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大鼠肾脏缺血再灌注损伤过程中水通道蛋白2的表达变化病理学与病理生理学专业论文
河北医科大学
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目 录
中文摘要 ··1
英文摘要 ·4
英文缩写 8
研究论文大鼠肾脏缺血再灌注损伤过程中水通道蛋白.2的表达变化 前言日lJ舌 · ”·I D 99
材料与方法 ·12
结果 ·21
附图 ·24
附表 ” ·3 1
讨论 ·33
结论 ... ·37
参考文献 38
综述水通道蛋白2的研究进展 42
致谢 ... ···5 1
个人简历 52.
万方数据
中文摘要大鼠肾脏缺血再灌注损伤过程中水通道蛋白一2的表达变化
中文摘要
大鼠肾脏缺血再灌注损伤过程中水通道蛋白一2的表达变化
摘 要
目的:肾脏作为高灌注器官,对缺血非常敏感,容易发生缺血再灌注 损伤(ischemical reperfusion injury,IRI)。肾IRI是缺血性急性肾功能衰竭 (acute renal failure,ARF)的重要损伤环节,其损伤的病理生理机制非常 复杂,目前对肾IRI病理生理机制的研究主要集中在肾小管上皮细胞的凋 亡和坏死、自由基的损伤作用、钙超载、能量代谢障碍、炎性介质和粘附
分子、细胞因子等方面,而对肾脏存在的水通道蛋白(AQPs)在这一病 理生理条件下的作用认识不足。为此,本研究通过建立大鼠的肾脏IRI模 型观察其AQP2表达变化与肾功能的关系,探讨ARF时多尿与AQP2表
达间的相关性,为临床防治ARF提供理论依据。
方法:选取50只健康成年的雄性SD大鼠,分为实验组和对照组, 实验组通过腹腔分离右侧肾蒂用无损伤动脉夹夹闭,45min后重新恢复肾 脏血液灌注来建立模型,对照组仅游离右侧肾蒂而不进行夹闭,45min后 关腹。实验组分别在1天、3天、5天、7天初始并收集尿液、全血和左 右侧肾脏,每组10只;对照组在1天后处死大鼠并收集标本。尿液用于 检测24h尿量和尿比重;全血分离出血清后用于检测肌酐、尿素氮的变化; 肾脏用于HE、免疫组化、QRT-PCR检测。通过HE染色观察肾脏的病理 学改变;用免疫组织化学方法检测AQP2的表达水平及分布情况;通过实 时荧光定量PCR检测大鼠肾脏内AQP2mRNA的表达水平。
结果:
1尿液变化:(1)24h尿量变化:缺血再灌注模型大鼠术后不同时间 的24h尿量变化各不相同。术后l天模型大鼠24h尿量异常增多,到术后 3天24h尿量达到最高值,而后逐渐降低,随着术后时间越长24h尿量慢 慢减少,至术后第7天24h尿量恢复至正常。假手术组大鼠24h尿量比术 后1天尿量少,但比7天组高。各组尿量变化均有统计学意义(PO.05)。 (2)尿比重变化:缺血再灌注组大鼠术后1天尿比重的水平降低,至术 后第3天,尿比重的水平降低至最低水平而后逐渐升高,术后第7天,尿 比重升高至正常水平。假手术组大鼠尿比重比7天和术后l天均高。术后
万方数据
中文摘要1天和7天的相比差异具有统计学意义(PO.05)。
中文摘要
1天和7天的相比差异具有统计学意义(PO.05)。
2肾功能指标:在缺血再灌注模型组尿素氮和肌酐在术后大鼠肾脏中 的表达升高,在术后第3天,尿素氮和肌酐的水平达到最高,而后逐渐降 低,至术后第7天,尿素氮和肌酐的水平恢复至正常值。尿素氮在术后1 天和术后5天的相比、7天和假手术1天组相比变化无统计学意义 (P0.05)。肌酐在7天和假手术1天组中相比变化无统计学意义
(尸O.05)。
3病理学观察:缺血再灌注大鼠术后的肾脏HE染色可见明显肾小管 变性、空泡和坏死。
4免疫组化:假手术组肾脏中左右侧AQP2的表达无统计学意义
pO.05)。缺血再灌注模型大鼠双侧肾脏中AQP2在术后不同时间的表达
均有统计学意义(尸O.05)。在模型大鼠左侧肾脏中AQP2在术后不同时 间中的表达有差异,术后第l天,左侧肾脏AQP2的表达异常升高(氏O.01, 差异有统计学意义),术后第3天达到最高,而后随着术后时间延长,左
侧肾脏AQP2的表达逐渐降低,到术后第7天,AQP2的表达恢复至正常 水平。
5 QRT-PCR:结果同
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