一种小鼠胆源性重症急性胰腺炎模型建立方法的改进.pdf

· 308  · 中华危重病急救医学  2016年4月第28卷第4期  Chin Crit Care Med，April 2016，Vol.28，No.4 ·论著· 一种小鼠胆源性重症急性胰腺炎模型  建立方法的改进           ， （ 、 ）； ， 210009   313000   （ ）； ， （ 210009   ）， （ ）； ， （ ） 210006   ： ， ： Email ouxilong@126.com DOI：10.3760/cma.j.issn.2095-4352.2016.04.004 【 】 摘要 目的  采用自制胆总管注射装置建立小鼠胆源性重症急性胰腺炎（SAP）模型，评价该装置对胆 总管逆行注射法的改进特点及安全性。方法  将36只雄性ICR小鼠按随机数字表法分为胆源性SAP模型组 和假手术（Sham）组，每组18只。以一次性胰岛素注射器（40 U）、200 μL塑料移液枪头、微量进样器（25 μL）为 基本材料自制一种小鼠胆总管逆行注射装置〔国家实用新型专利（ZL 2014 2 0694365.4）〕，应用该装置向小鼠 胆总管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠（1 mL/kg）制备胆源性SAP模型；Sham组注射等量生理盐水。两组分别于 术后6、24、48 h处死6只小鼠，取腹主动脉血，检测血清淀粉酶（AMY）、丙氨酸转氨酶（ALT）、肌酸激酶同工酶 2+ （CK-MB）、血肌酐（SCr）、氧合指数（PaO2/FiO ）、Ca 水平等；取胰头组织行苏木素-伊红（HE）染色，光镜下观2 察胰腺组织病理学改变并进行损伤评分。结果  使用自制胆总管注射装置在直视条件下成功完成小鼠胆总管 逆行穿刺及药物注射。术后6 h模型组血清AMY、ALT、SCr即较Sham组明显升高，24 h达峰值，48 h稍有下 降，但仍显著高于同时期Sham组〔24 h AMY（U/L）为7 325±1 154比1 737±197，ALT（U/L）为176.0±5.0比 38.3±2.0，SCr（μmol/L）为46.3±1.5比17.8±0.6，均P ＜0.01〕；模型组术后6 h CK-MB即较Sham组显著升高， 48 h达峰值（U/L：6 h为749.8±42.2比383.3±35.5，48 h为3 340.1±203.6比704.6±63.5，均P ＜0.01）；术后 6 h PaO2/FiO 即较Sham组显著降低，随后开始升高，48 h恢复至Sham组水平〔mmHg（1 mmHg＝0.133 kPa）：2 6 h为327.5±33.8比424.8±31.0，P ＜0.01；48 h为429.8±41.8比464.7±43.3，P ＞0.05〕；术后血Ca2+ 水平持 续降低，48 h显著低于Sham组（mmol/L：1.58±0.14比2.45±0.21，P ＜0.01）。Sham组小鼠术后胰腺以水肿为 主，且随时间延长而逐渐改善；模型组小鼠术后6 h胰腺即有局灶性坏死表现，并继发性加重，至48 h胰腺小叶 结构消失、炎性细胞广泛浸润。与Sham组比较，模型组各时间点胰腺组织病理学评分均显著升高，48 h达峰 值（分：13.3±0.3比3.0±0.1，P ＜0.01）。结论  自制小鼠胆总管注射装置实现了直视下通过胆总管逆行注射 法建立小鼠胆源性SAP模型，降低了手术难度，制模结果符合胆源性SAP临床病情特点。 【 】 关键词 胰腺炎，急性，重症；  动物模型；  小鼠 基金项目：国家自然科学基金；国家实用新型专利（ZL 2014 2