第五篇实验动物环境科学及环境质量.ppt

按发生应激的长短分 急性应激——机体受到突然刺激发生的应激。 慢性应激——长期而持久的紧张状态。 按应激的结果 生理性应激（良性应激）——机体适应了外界刺激，并维持了机体的生理平衡。 病理性应激——（恶性应激）由于应激而导致机体出现一系列机能、代谢紊乱和结构损伤，甚至发病。 即应激反应过于强烈或持久，超过机体负荷的限度，内环境的稳定性破坏，这意味着疾病的开始甚至死亡的到来。 除疾病外，还有饥饿、温度高低、运输震动、拥挤、噪音、恐惧焦虑、疲劳等均可引起。 5.4.2 实验动物应激反应的特点 (1)应激反应的非特异性。 不同应激源都能引起相对相同的应激反应； (2)应激源的广泛性。 凡能引起应激反应的一切环境刺激； (3)应激反应的双重性。 对实验动物健康生长发育、繁殖免疫产生不利影响； 动员机体全部防御机理保持内环境平衡。 (4)应激反应诱发实验动物过氧化损伤。 5. 4.3应激反应的主要表现 (1)行为适应性改变： 急性应激→增强唤醒、觉醒意识，抑制进食，繁殖和应激反应 (2)身体的适应性改变： 氧和营养素直接至中枢系统和应激部位，改变心血管张力，增加血压和心率和呼吸率，增加糖原分介和脂肪分解，加强毒性代谢产物的解毒，抑制炎症/免疫反应。 自由基、活性氧、活性氮基团异常活跃。形态学改变则主要以肾上腺肿大、淋巴结、脾脏萎缩，胃肠道急性溃疡或糜烂等。 5.4.4 环境应激对实验动物的影响 （1）制动应激的影响。 保定在椅子上的恒河猴与不保定的相比，血清乳酸脱氢酶总活性高出8～10倍。 小型猪保定时，血浆皮质醇浓度升高，这种变化与葡萄糖、尿素浓度变化相关联。不同的保定方式对皮质醇影响也不同，用脖绳保定与围栏保定相比，前者血清中皮质醇浓度明显高于后者。 (2)手术实验应激的影响 手术应激损伤局部可释放无机离子K+、H+、5-HT，前列腺素，花生四烯酸，缓解肽和P物质，尤其是巨噬细胞和淋巴细胞衍生的白介素和肿瘤坏死因子。 胰腺切除术中，白介6和TNF作用于下丘脑—垂体—肾上腺轴(HPA) 导致ACTH强烈升高的应激反应，另外手术应激的免疫抑制效应最明显，与糖皮质激素类药物作用方式相似。 (3)运输的影响 在实验动物的运输过程中，由于恐惧与疼痛、饥渴、疲劳、通风不良、过度拥挤、长时间的旅程而得不到“安宁”等因素会引发动物发生应激反应。发生轻度的应激反应，动物可表现为体重下降、脱水及对疾病的抵抗力降低，严重时可影响动物的质量，甚至导致动物在运输途中衰竭死亡。 在运输的不同阶段，动物表现出的症状也不相同。初期动物在恐惧、疼痛、关禁、拥挤等应激因子的刺激下，表现不安、狂躁和敏感性增高，或畏缩、颤抖和咬包装盒（箱）等。经过一段时间逐渐适应后，动物安静下来、对环境表现出冷漠，对正常刺激不反应等。这时机体易受到疾病侵袭。如果再进一步的受到刺激可能引起体温升高、呼吸困难，出现消瘦和脱水状态，发生疾病甚至死亡。 一般大小鼠经过运输体重消耗都在10%左右，如果运输时间长、路途远、包装密度大体重消耗可能达到15%左右；豚鼠在运输过程中体重的消耗为20%左右，也与运输的距离、时间长短、包装密度有直接关系。 防止动物应激的重要措施 缩短运输时间，利用现代航空运输等手段 运输动物的笼具要有足够大的空间，较低的密度。允许动物舒适地站立、躺卧或转身，且能防止动物逃逸。成群动物的运输应有让其自由活动的空间。 长距离和长时间运输时，要注意防寒和降温措施。 动物的适应性饲养 适应性喂养，是指实验动物由繁殖地或供应商处搬到实验动物房以后，在实验之前，为了使之适应环境而喂养几天的过程。一般至少为期三天，最好是一周，本中心是10天。 第一，动物从一个地方进入到新的环境之后，它们要自行调整一下，才能适应。 第二，在适应性喂养期间可密切观察动物是否健康 实验动物体重尚达不到实验所要求的大小，可适当延长适应性喂养的时间。 5.4.5 环境应激反应的判断 5.4.5.1临床表现 急性应激时： 惊慌不安，眼球突出，目光锐利，体温急剧升高，心率加快，呼吸急促，肌肉震颤，全身发抖，食欲废绝，少尿或无尿。有时频频排粪、尿，皮肤未见红斑，粘膜发绀，严重的发生休克死亡。 慢性应激时： 体重减轻，繁殖率降低，免疫力下降，极易发生感染性疾病。 手术技巧 动物实验中除了要注意选择合适的实验动物，所用试剂要纯正，仪器要灵敏，方法要准确外，还必须注意手术技巧，即操作技术的熟练。 手术熟练可以减少对动物的刺激，动物所受创伤、出血等就少，将会提高实验成功和实验结果的正确性。 要达到动物手术操作熟练，必须要了解各种动物的特征，组织、器官的位置，神经、血管的走行特点，通过在动物身上反复实践，即可达到熟中生巧、操作自如。 5.2.6 营