基于目基因捕获二代测序技术对质谱检测阳性患儿分子.PDF

·４０· ＣｈｉｎＪＥｖｉｄＢａｓｅｄＰｅｄｉａｔｒ　Ｆｅｂｒｕａｒｙ２０１５，Ｖｏｌ１０，Ｎｏ１ ·论著· ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３５５０１．２０１５．０１．００７ 基于目的基因捕获的二代测序技术对质谱检测阳性 患儿的分子诊断 １，５ ２，５ ２ ３ １ １ ４ ３ ４ 吴冰冰 　陆　炜 　杨　琳 　姜萍萍 　李　刚　张　萍 　王慧君 　高　瑞 　周文浩 　　摘要　目的　运用基于目的基因捕获的二代测序技术，对质谱检测阳性的遗传代谢病疑似患儿进行基因检测，探讨二 代测序技术在遗传代谢性疾病诊断的应用价值。方法　回顾性收集复旦大学附属儿科医院遗传代谢专科门诊收治的、质 谱检测阳性遗传代谢病疑似患儿的剩余干血滴滤纸片，行目的基因捕获的二代测序，行Ｓａｎｇｅｒ进行验证。结果　２０１３年６ 月至２０１４年５月共有４８例质谱检测阳性的遗传代谢病疑似患儿纳入本文分析，４０例完成二代测序，男性２２例。４０例测 序标本中，２９例（７２．５％）检测到与临床症状相符的基因变异，包括甲基丙二酸血症６例，ｃｉｔｒｉｎ缺陷病６例，高苯丙氨酸血 症５例，戊二酸血症３例，其他遗传代谢病９例。２例疑似ｃｉｔｒｉｎ缺陷病的标本在ＳＬＣ２５Ａ１３基因上仅检测到单个致病性突 变，进一步行长片段ＰＣＲ，检测到２例标本均存在３ｋｂ的杂合插入突变。结论　 基于目的基因捕获的二代测序技术在对 临床疑似遗传代谢病的检测中，有着较高的阳性诊断率，不仅能为临床医生提供可靠的分子诊断依据，而且可以根据致病 基因对疾病分型，有效地为后续的临床治疗和遗传咨询提供依据。 关键词　目的基因组合；　二代测序；　分子诊断；　遗传代谢病 Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｔａｒｇｅｔｅｄｎｅｘｔｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｉｎｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆａｂｎｏｒｍａｌ ｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙａｎａｌｙｓｉｓｆｉｎｄｉｎｇｓ １，５ ２，５ ２ ３ １ １ ４ ３ ＷＵＢｉｎｇｂｉｎｇ ，ＬＵＷｅｉ ，ＹＡＮＧＬｉｎ，ＪＩＡＮＧＰｉｎｇｐｉｎｇ，ＬＩＧａｎｇ，ＺＨＡＮＧＰｉｎｇ，ＷＡＮＧＨｕｉｊｕｎ，ＧＡＯＲｕｉ，ＺＨＯＵＷｅｎ ４ ｈａｏ（１ＩｎｓｔｉｔｕｅｏｆＰｅｄｉａｔｒｉｃｓ，ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＮｅｏｎａｔａｌＤｉｓｅａｓｅｓ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＨｅａｌｔｈ，Ｃｈｉｌｄｒｅｎ＇ｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＦｕｄａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１１０２；２ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈｉｌｄｒｅｎ＇ｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＦｕｄａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１１０２；３ＢＧＩＤｘ，ＢＧＩ Ｓｈｅｎｚｈｅｎ，Ｓｈｅｎｚｈｅｎ５１８０８３；４ＳｈａｎｇｈａｉＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＢｉｒｔｈＤｅｆｅｃｔｓ，ＴｈｅＴｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌＭｅｄｉｃｉｎｅＣｅｎｔｅｒｏｆＣｈｉｌｄｒｅｎＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄＤｉｓｅａｓｅｏｆＦｕｄａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＮｅｏｎａｔａｌＤｉｓｅａｓｅｓ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＨｅａｌｔｈ，Ｃｈｉｌｄｒｅｎｓ＇ＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＦｕｄａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｓｈａｎｇｈａｉ２０１１０２，Ｃｈｉｎａ；５Ｃｏｆｉｒｓｔａｕｔｈｏｒ） ＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇＡｕｔｈｏｒ：ＺＨＯＵＷｅｎｈａｏ，Ｅｍａｉｌ：ｚｗｈｃｈｆｕ＠１２６．ｃｏｍ；ＧＡＯＲｕｉ，Ｅｍａｉｌ：ｇａｏｒｕｉ＠ｇｅｎｏｍｉｃｓ．ｃｎ ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｖａｌｕｅｏｆｔａｒｇｅｔｅｄｎｅｘｔｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇｆｏｒｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｄｉａｇｎｏｓｉｓｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎｗｉｔｈｈｉｇｈｒｉｓｋｏｆｉｎｈｅｒｉｔｅｄｍｅｔａｂｏｌｉｃｄｉｓｏｒｄｅｒｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＦＴＡｃａｒｄｓｗｉｔｈｄｒｉｅｄｂ