吡喹酮和类似物p96的立体选择性药动学及代谢相关机制初步研究药物分析学专业论文.docxVIP

山东大学硕士学位论文2．2．2标准曲线系列溶液的配制 山东大学硕士学位论文 2．2．2标准曲线系列溶液的配制 ．．16 2．2．3质量控制(QC)溶液的配制 16 2_3动物实验 ．1 6 2．3．1实验动物 1 6 2．3。2动物实验分组 1 7 2．3．3动物实验设计 1 7 2．4血浆样品处理 17 2．4．1标准曲线样本的配制与处理 ．17 2．4。2质控(Qc)样本的配制与处理 17 2．4．3大鼠血浆样品的处理 ．．1 7 2．5方法学验证 1 7 2．5．1专属性 17 2．5．2线性范围与最低定量限 ～18 2．5．3精密度与准确度 ．．1 8 2．5，4稳定性 l 8 2．5．5方法回收率与基质效应 一1 8 2．6大鼠血浆样品分析 19 3实验结果与讨论 ．19 3．1 LC．MS／Ms条件优化 ．19 3．2方法学验证 19 3．2．1专属性 19 3．2．2线性范围与最低定量限 ．．20 3．2．3精密度与准确度 20 3．2．4稳定性 20 3．2．5方法回收率与基质效应 ～22 3．3大鼠体内立体选择性药物动力学研究 一22 4本章小结 ．．26 第三章P96在大鼠体内的立体选择性药物动力学研究 27 1实验材料 27 万方数据 山东大学硕士学位论文1．1药品试剂 山东大学硕士学位论文 1．1药品试剂 ．27 1．2仪器设备 ．27 2实验方法 27 2．1仪器条件 ．27 2．1．1液相色谱分析条件 ．．27 2．1．2质谱分析条件 28 2．2溶液配制 ．28 2．2．1内标溶液的配制 28 2．2．2标准曲线系列溶液的配制 一28 2。23 QC溶液的配制 ．28 2．3动物实验 ．28 2．3．1实验动物 28 2_3．2动物实验分组 29 2．3．3动物实验设计 29 2．4血浆样品处理 29 2．4．1标准曲线样本的配制与处理 ．29 2．4．2 Qc样本的配制与处理 29 2．4．3大鼠血浆样品的处理 ．．29 2．5方法学验证 29 2．6大鼠血浆样品分析 30 3实验结果与讨论 ．30 3．1 Lc．Ms／Ms条件优化 ．30 3．2方法学验证 30 3．2．1专属性 30 3．2．2线性范围与最低定量限 ．．31 3．2．3精密度与准确度 31 3^2．4稳定性 32 3．2．5方法回收率与基质效应 ．．33 3，3大鼠体内立体选择性药物动力学研究 ．．33 11 万方数据 山东大学硕士学位论文4本章小结 山东大学硕士学位论文 4本章小结 36 第四章基于PXR的报告基因法检测PZQ和P96的立体选择性差异 ．38 1实验材料 一38 1．1药品试剂 ．38 1．2仪器设备 ．38 1．3细胞及质粒 39 1．4常用试剂的配制 39 2实验方法 一39 2．1质粒的提取 ．39 2．2 HepG2细胞常规培养 39 2．3瞬时转染 ．39 2．4双荧光素酶活性的测定 40 2．5报告基因法的可靠性与准确性检测 ．．41 2．6共转染条件优化 41 2．7报告基因法用于检测PZQ对PXR野生型(PXR、Ⅳt)激活效应的 差异 一42 2．8报告基因法用于检测P96对PxR野生型(PxRW)激活效应的差 异 ．42 2．9 westem blottiIlg检测PZQ对cYP3A4酶的诱导作用 42 2．10 Westem blottmg检测P96对CYP3A4酶的诱导作用 42 2．11报告基因法用于检测PZQ对5种PxR突变体激活效应的立体选 择性差异 43 2．12分子对接模拟PzQ与PxR的结合 ．44 2．1 3分子对接模拟P96对PXR的结合 44 2．14实验数据分析 ．．44 3实验结果与讨论 ．44 3．1质粒纯度检测 ．44 3．2报告基因法的可靠性与准确性检测 45 3．3共转染最优条件的确定 46 TV 万方数据 山东大学硕士学位论文3．4 山东大学硕士学位论文 3．4 PZQ对PXR、vt激活效应的立体选择性差异 47 3．5 P96对PXR、Ⅳt激活效应的立体选择性差异 。49 3．6 PZQ对CYP3A4酶表达的诱导作用 ．．49 3．7 P96对CYP3A4酶表达的诱导作用 50 3．8 PzQ对5种PxR突变体激活效应的立体选择性差异 5 1 3．9 PXR基因多态性对PZQ激活效应的影响 56 3．10分子对接模拟PzQ与PxR的结合 一57 3．11分子对接模拟P96与PXR的结合 58 4本章小结 一60 全文总结 62 参考文献 64 致{射 69 攻读学位期问的学术成果 70 附录 71 V 万方数据 山东大学硕士学位论文CATALoGUE 山东大学硕士学位论文 CATALoGUE ChiIlese albstract ．1 En91ish