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0,ti—f77
1ssN l007 7626 中国生物化学与分子生物学报 第 l6卷第 2期
CN ll一3870／Q Chin．J．Biochem．Mo1．Bio1．2000，Vo1．16，No．2，169～177 2000年 1月
表达 barnase基因的重组棉铃虫核型
多角体病毒的构建及其杀虫活性研究 54’5．纽 ．；
告蟠盛
齐义鹏 ／刘映乐 朱反修 s47t．I
(武主。再；研宽所盅汉 430072)
摘要 将台有 barna~e基因与杆状病毒多角体基 因(ph)的重组转座栽体pFbBar在太肠杆菌中与
舍有棉铃虫核型多角体病毒 (HaNPV)的穿棱栽体 Hanpvid转座井提取重组穿授栽体 DNA转染
棉铃虫细胞+得到重组棉铃虫病毒rHa—Bar．其舟子杂交证明，昆虫细胞中有rHa—Bar的bar基因特
录奉存在，并能袁达产生 33kD 的多南体蛋 白和J2kD 的barnaae．在乎扳上，barnase能降解
RNA，出现清晰的降解圈．rHa—Bar对三龄棉铃虫幼虫的毒力比野生型 HaNPV 的LD。。减少20 ，
LT5o减少3O ．用harnase的拮抗基 因barstar构建 了具有 Neo抗性、井能稳定表达 barstar的棉
铃虫转化细胞AM1-NB．以携带barnase基 因的重组病毒rHa—Bar分别感染转化细胞和正常细胞，
关键词娶篡辈：蠢早，B舯arsta的r基因，转化细胞系，，特座：，重组棉铃虫核型多角社强病毒mHa枷、、靶斗J座壬彳；
中圉分类号 Q7S 牺 末唯 ．畚象落性
ConstructionofaRecombinantHeiiothisarmigeraNuclearPolyhedrosis
VirusExpressingBarnaseGeneanditsPest—killingActivity
ZHU Ying+Q1Yi—peng，LIU Ying—le，ZHU Fan—xiu
(1n~ ute Virology-Wuhanu f ，W uhan 430072，China)
Abstract A recombinationshuttlevector(Hanpvid)pHa—Ba rexpressingbarnasegene (bar)un
dercontrolbypolyhedringene (户^)promoterwasconstructedaftertranspositionbytransfoming
recombinationplasmidpFb—Barcarryingphandbarnasegene (bar)intoE．coliDH15Ha，which
containedtransposon-shuttlevectorHanpvidcomprisingofHeliothisarmigeranuclearpolyhedro~
sisvirus (HaNPV)genomicDNAandatransposoncassette．RecombinantHaNPV(rHa—Bar)was
obtainedbytransfectedrecombinantHanpvidintoH liothisarmigeracellsHZ—AM 1．Dotblotting
analysisshowedth
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