丁苯酞对大鼠肝组织甘油三酯代谢相关基因表达的影响神经病学专业论文.docxVIP

目 目 录 中文摘要 ： ··1 英文摘要 O O 5 英文缩写 ll 研究论文丁苯酞对大鼠肝组织甘油三酯代谢相关基因表达的影响 前言·丹IJ舌“一””“”········ ···一“””·· ·“···“ ······”“” ””“······ ””一lZ·一·一12 材料与方法 o D 13 结果··· ········· ····· ····· · ······ ······ ··········一 ·15 附l蛰······ ····· ······· ·· ····· · · · ·· “一··18 附表 28 讨论· ·· ··· ··· · · ············ · ·· ·29 结论· · ········ ·· · ····· ·· ··· · 一 ·45 参考文献 46 综j苤 ·· · “ ·57 致谢 ·· ···· ··· ··· ·· ···· · “ 70 个人简历 71 中文摘要丁苯酞对大鼠肝组织甘油三酯代谢相关基因表达的影响 中文摘要 丁苯酞对大鼠肝组织甘油三酯代谢相关基因表达的影响 摘 要 目的：丁苯酞具有改善局部脑缺血区微循环和血流量，保护线粒体的 结构和功能，缩小脑梗塞面积，减轻脑水肿等作用。在临床上，丁苯酞广 泛用于治疗缺血性脑血管病，并作为脑血管病后改善智能和功能恢复的首 选用药。从发病机制上看，脑血管病的发生与脂类代谢密切相关，其中甘 油三酯代谢异常是脑血管病发生的重要因素之一。目前国内对丁苯酞与甘 油三酯代谢的研究尚少见报道。有必要进一步研究丁苯酞对甘油三酯代谢 的影响，以期在日后应用丁苯酞治疗脑缺血性疾病中，指导临床合理用药。 基因芯片(Gene chip)又称DNA芯片(DNA chip)，是一种新型的基因 功能分析技术，具有高通量、微型化和自动化的特点，成为后基因组时代 基因功能分析的最重要技术之一。基因芯片的基本原理是碱基互补配对和 分子杂交，是指将许多特定的寡核：旨酸片段或基因片段有规律地排列固定 于支持物上，然后与待测的标记样本基因按碱基配对原理进行杂交，再通 过激光共聚焦荧光显微镜检测系统等对芯片进行扫描，并配以计算机系统 对荧光信号做出比较和检测，从而迅速得出所要的信息。基因芯片技术的 优点在于无需先前知道测试样品中靶基因的作用情况，可同时观察成千上 万个基因表达的结果，高效、快速、多参量地对基因进行检测，从整体基 因表达谱水平研究疾病。本研究对利用基因芯片技术获得的不同剂量丁苯 酞作用下，在不同用药时间点大鼠肝脏基因数据的观察，筛选出有意义基 因，对其表达变化情况进行深入分析，从分子生物学水平掌握丁苯酞对甘 油三酯代谢的影响，为临床合理用药提供帮助。 方法：1 数据取得情况实验大鼠12组，用不同剂量的丁苯酞灌胃 3天、lO天、20天、灌胃10天停药10天。基因芯片分配：一倍剂量组4 片：两倍剂量组4片；四倍剂量组4片。对杂交后的基因芯片通过共聚焦 显微镜扫描取得扫描数据。 2整理数据将已取得的不同剂量、不同时间点丁苯酞喂养大鼠后获得 的12个rat 384基因芯片检测数据Excell文件进行整理。 中文摘要3筛选甘油三酯代谢相关基因 中文摘要 3筛选甘油三酯代谢相关基因 找出甘油三酯代谢相关基因得出比值， 并汇总为一个甘油三酯代谢相关基因比值Excell文件。 4 找出甘油三酯代谢中有意义基因 从甘油三酯代谢相关基因比值 Excell文件中找出影响甘油三酯代谢的关键基因。 结果：丁苯酞喂养大鼠后用大鼠rat 384基因芯片检测，获得4096 个基因和表达序列，从中找出影响甘油三酯代谢的关键基因5个 AF021 348(线粒体甘油．3．磷酸脂酰转移酶)、NM 012597(肝脂肪酶)、 NM 017075(乙酰辅酶A乙酰转移酶1)、BC087036(极长链脂酰辅酶 A脱氢酶)、NM 001004085(肉碱乙酰转移酶)，具体分析这几个基因 随用药剂量及用药时间发生上调或下调而引起其表达变化的情况。 1 一倍剂量(60mg／kg／day)用药3天有意义基因表达变化情况 AF021348、NM 012597、BC087036、NM 001004085比值在正常范围。 NM 017075受到影响，上调超出工E常范围。 2 一倍剂量(60mg／kg／day)用药10天有意义基因表达变化情况 AF021348、NM 012597、NM 017075、BC087036、NM 001004085这5 个基因比值皆在正常范围。其中，NM 017075在此用药状态下，下调到 正常范围。 3 一倍剂量(60mg／kg／day)用药20天有意义基因表达变化情况 NM 012597、NM 01