肺间质纤维化机制及γ干扰素和地塞米松干预治疗的实验研究内科学呼吸系病专业论文.docxVIP

山东大学硕士学位论文符 山东大学硕士学位论文 符 号 说 明 英文缩写 英文全称 中文全称 ILD interstitial lung diseas 间质性肺疾病 PF pulmonary fibrosis 肺纤维化 IPF Idiopathic pulmonary fibrosis 特发性肺纤维化 ECM extracellular matrix 细胞外基质 BLM Neomycin 博来霉素 DXM dexamethasone 地塞米松 IFN吖 interferon gamma Y干扰素 Fb fibroblast 成纤维细胞 MFb myofibroblast 肌成纤维细胞 AM alveolar macrophage 肺泡巨噬细胞 0【．SⅣ【A a—smooth muscle actin Ci一平滑肌肌动蛋白 TGF-p transforming growth factor-13 转化生长因子13 PDGF platelet derived growth factor 血小板源性生长因子 HE haematoxylin and eosin 苏木素／伊红染色 SABC streptacvidin·-biotin··complex 链酶亲和素一生物素一过氧化物 酶复合物 PBS phosphate buffered saline solution 磷酸盐缓冲液 DAB diaminobenzidine 二氨基联苯胺 NE neutrophil elastase 中性粒细胞弹性蛋白酶 CFA cryptogenic fibrosing alveolifis 隐源性纤维性肺泡炎 MCP monocyte chemoaRractant protein 单核细胞趋化蛋白 一6一 原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立 进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含 任何其他个人或集体己经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出 重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责 任由本人承担。 论文作者签名：———— 日 期： 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校 保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被 查阅和借阅；本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分内容编 入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文 和汇编本学位论文。 (保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名：——导师签名：——日 期： 山东大学硕士学位论文肺间质纤维化机制及Y一干扰素和地塞米松 山东大学硕士学位论文 肺间质纤维化机制及Y一干扰素和地塞米松 干预治疗的实验研究 专 业： 内科学(呼吸系病) 硕士研究生： 申玉瑶 导 师： 王建平教授 摘 要 【目的】 观察大鼠肺间质纤维化形成过程中TGF．Bl、PDGF。AA、 PDGF．BB与肌成纤维细胞的标志物a—SMA在不同时间的表达量，探索细 胞因子在成纤维细胞转分化为肌成纤维细胞过程中的作用及肺间质纤维化 的可能机制。应用博来霉素诱导大鼠肺纤维化后，分别应用Y一干扰素和地 塞米松干预，观察干预以后大鼠肺间质纤维化程度以及不同时间段的 TGF．Bl、PDGF—AA、PDGF．BB与0【一SMA的表达，与未干预组比较以评价 Y一干扰素和地塞米松对肺间质纤维化的治疗效果，并探讨其机制。 【方法】雄性Wi star大鼠72只，体重1 60’220 g，随机分为4组：A组 (正常组)9只，水合氯醛麻醉后气管内一次性滴注约0．1mL的生理盐水做 对照。B组(模型组)、C组(Y一干扰素组)、D组(地塞米松组)各21只， 水合氯醛麻醉后气管内一次性滴入含博来霉素的生理盐水约0．1 mL(5mg／kg)，滴注后立即将动物直立旋转以使药液在肺内分布均匀，致大鼠 肺纤维化。A、B组次日起每天腹腔注射0．3ml生理盐水，C组次日起每天腹 腔注射0．3ml y一干扰素(12×105IU／m1)，D组次日起每天腹腔注射地塞米 松lmg／kg。在第7、14、28天A组处死大鼠3只，其他组分别处死大鼠7 只，暴露气管，向大鼠肺内灌注10％甲醛溶液使胸膜展平后摘取右肺浸入 10％甲醛溶液中固定。常规石蜡包埋，切片(4 u m)，行HE和免疫组化染色。 镜下观察大鼠肺泡炎、肺纤维化程度和免疫组化四个指标表达的动态变化。 统计学处理：采用SPSSl0．0行统计分析，将等级资料转化为计量资料， 实验数据用(X±S)表示。不同组间行两两比较t检验，小组中有不服从正态 分布或方差不齐时采用成组设计多样本比较的秩和检验，以