肝细胞生长因子hgf对系统性病皮硬皮肤成纤维细胞ⅰ型胶原的影响及其可能机制皮肤科专业论文.docxVIP

中 中 文摘要 目的：研究肝细胞生长因子对系统性硬皮病患者皮肤成纤维细胞 中I型胶原表达的影响并探讨其可能的机制，为临床寻找有效的治疗 系统性硬皮病的方法提供依据。 方法：1．系统性硬皮病患者及正常人皮肤活检标本各5例进行成 纤维细胞原代培养，用角蛋白和波形蛋白染色进行成纤维细胞的鉴 定。2．MTT法检测HGF对皮肤成纤维细胞增殖活性的影响。3．RT-PCR 方法检测SSc患者及正常人皮肤成纤维细胞中I型胶原、COX-I、 COX-2的mRNA表达水平。4．RT-PCR方法检测不同时间点HGF对SSe 患者皮肤成纤维细胞中I型胶原、COX-2的mRNA表达水平的影响。一 5．选择性CoX一2抑制剂NS398与HGF联合干预后， RT-PCR方法检测 不同时间点SSc皮肤成纤维细胞中I型胶原mRNA表达水平的变化。 结果：1．培养细胞具有成纤维细胞的形态，角蛋白染色阴性，波 形蛋白染色阳性。2．20ng／ml HGF在48小时内对皮肤成纤维细胞的 增殖活性无明显影响。3．SSe患者皮肤成纤维细胞与正常人皮肤成 纤维细胞相比，COX一2的mRNA表达下降，I型胶原的mRNA表达增加， 而COX-I的mRNA表达无明显差异。4．HGF可诱导SSc皮肤成纤维细 胞中COX一2 mRNA的表达(P0．05)，其表达量与HGF的作用呈时间依 赖性递增。HGF可抑制SSc皮肤成纤维细胞中I型胶原mRNA的表达 (PO．05)，其表达量与HGF的作用呈时间依赖性递减。5．选择性 COX-2抑制剂NS398可显著减弱HGF对SSc皮肤成纤维细胞中．I型胶 原表达的抑制作用(P0．05)。 硕七学位论文结论：HGF可诱导SSc患者皮肤成纤维细胞中COX-2的表达，并 硕七学位论文 结论：HGF可诱导SSc患者皮肤成纤维细胞中COX-2的表达，并 抑制I型胶原的合成。选择性COX一2抑制剂NS398可显著减弱HGF对 SSc患者皮肤成纤维细胞胶原合成的抑制作用，提示HGF具有抗纤维 化作用，其机制可能依赖于COX-2的表达。 关键词：系统性硬皮病，肝细胞生长因子，环氧合酶一2，成纤维 细胞 n 硕士学位论文 硕士学位论文 英文摘要 objectives：to investigate the effect of hepatocyte growth factor (HGF)on the expression of type I collagen in skin fibroblasts of patients with systemic sclerosis and analyzed the mechanisms underlying the effect in vitro． Methods：0)Skin fibroblasts from five patients with Systemic sclerosis(SSc)and西e nomal human(NS)lesions were primarily cultured in vitro and identified by immunocytochemical staining．(2)The impact of HGF on the proliferation of skin fibroblasts was assessed by MTT assay．(3)Reverse·-transcription polymerase chain reaction(RT-·PCR) analysis the expression of type I collagen，cydooxygenase一1(COX一1)， cyclooxygenase-2(COX-2)in both SSc and NS fibroblasts．(∞After fibroblasts were treated with HGF for 0h，6h，12h，24h，48h，the expressions of type I collagen mRNA and COX一2 mRNA in SSc fibroblasts were detected by RT-PCR．(5)After fibroblasts were treated with NS398 combined with HGF for Oh，6h，12h，24h，48h，the expressions of type I collagen mRNA in SSc fibroblasts were detected by RT-PCR． Results：(1)Cultured cells had the normal form of fibroblasts and were s