质谱扫描模式与子化模式.pptVIP

1200/1200L GC/MS Scan Modes GC/MS 扫描模式与离子化方式 扫描模式 – full scan全扫描 扫描模式 – SIM选择性离子扫描 扫描模式 – 单反应监测SRM(MSMS技术) Scan Modes – 多反应监测MRM(MSMS) Scan Modes –母离子扫描 Precursor Scan Scan Modes – 子离子扫描Product Scan Scan Modes – 中性丢失扫描Neutral Loss Scan Many Scan Modes 各种扫描模式的好处 全扫描Full Scan 可以得到丰富的质谱图信息 适用于未知物的分析 选择性离子监测Selected Ion Monitoring (SIM) 比全扫描具有更高的灵敏度 样品基质不是太复杂时效果较好 MSMS技术 (SRM和MRM) 对于基质非常复杂的样品灵敏度较高 有益于化合物结构解释 各种扫描模式的好处 母离子扫描Precursor Scan 有利于监测具有相同结构,分子量相同的不同分析物 (e.g. steroids) 子离子扫描Product Scan 适于鉴定不同的官能团,用于结构解释 中性丢失Neutral Loss Scan 利于鉴别化合物是否具有一定的官能团 (e.g. –OH) Relationship of S/N to # SIM Ions SIM vs Full Scan 的好处 Full Scan 可以获得很多谱图信息 最好的扫描方式 更加适合于未知化合物的鉴定 更好的谱库搜索 Selected Ion Monitoring (SIM) 当需要比全扫更好的灵敏度时 可以获得 5 - 50 倍灵敏度的提高(取决于检测的离子数和基质的类型). 可以消除一些基质干扰(但MSMS是消除基质的最好方法) 离子化模式: 1 EI 2 CI:PCI,NCI,唐氏放电CI 离子化类型 Electron Ionization (EI) ~ 70 eV, 硬离子化 Positive Chemical Ionization (PCI) ~ 12 eV, 软离子化模式 Electron Capture Negative Ionization (ECNI)电子捕获负离子化 解离俘获 ABC + e- ? AC + B- (0.1-10 eV) 离子对形成 ABC + e- ? AB+ + C- + e- (10-15 eV) PCI Step #1: 形成试剂离子 第一步 – EI离子化 CH4: CH4 + e- ? CH4+ + 2e- 碎片形成 CH3+, CH2+, CH+ 第二步 – 分子离子反应形成稳定的试剂离子: CH4+ + CH4 ? CH3 + CH5+ CH3+ + CH4 ? H2 + C2H5+ CH5+ 和 C2H5+ 是主要的分子离子碎片 PCI Step #2: 待测物的离子化 在试剂离子和待测物之间产生反应 形成准分子离子峰 (M+1) CH5+ + M ? CH4 + MH+ M+1离子可以进一步碎裂产生复杂的CI质谱图 形成加合离子 C2H5+ + M ? [M + C2H5]+ M+29 加合离子 C3H5+ + M ? [M + C3H5]+ M+41 加合离子 质子转移的分子离子峰 CH4+ + M ? M+ + CH4 减氢物形成 (M-1) C3H5+ + M ? C3H6 + [M-H]+ 饱和烃经常会显示 举例: EI vs. PCI (可卡因) 可卡因(Cocaine)是一种滥用药物,在EI中分子离子峰较弱. CI用来确认分子量 首先, 来看一下NIST库中的EI谱图... EI 质谱图(Cocaine) 碎片很多 分子离子峰很弱: m/z 303 CH4 PCI 质谱图( Cocaine) 不同的CI试剂的作用 “硬” CI 试剂-甲烷 转移足够的能量引起更多的离子碎片,如可卡因的质谱图 “软” CI 试剂-异丁烷 产生更多的M+1峰 ... 异丁烷的 PCI质谱图( Cocaine) 软试剂 – 离子碎片较少 CI试剂的亲质子能力 负离子化学源 (NCI) ECD-最常见的MS ECD 待测物受限制 (高电负性) 高选择性和超低检测限 SIM 模式可以获得足够灵敏度 也可能用于 MS/MS 选择性非常高 但是NCI离子化的化合物经常不适合做MSMS.因为msms需要的碰撞解离能量可以抑制电子(分析物不再离子化) NCI的应用 NCI用来检测苯的浓度. s-苯汞酸(s-PMA) 是苯的代谢物,可以在尿中检出. 检测此类化合物的主要困难是s-PMA含量很低,有大量的基质干扰存在,要求具有选择性和特殊性的