猪病的实验室诊断.docVIP

猪病的实验室诊断 （一）猪的粪尿常规检查法 1.尿中的潜血检査 肾、膀胱及尿路的出血性疾病以及 溶血性疾病?如猪瘟、猪丹毒、新生仔猪溶血病等，在其尿液中均含有血液或血红蛋口,但若仅 冇少量，肉眼直接看不到，谓之潜血,必须借助化学方法來测定。常用联苯胺测定法。 （1） 原理血红蛋白中的铁，具有过氧化物酶的作用，可分解过氧化氢放出氧,使联苯胺氧化呈绿色 或蓝色。 （2）试剂①联苯胺冰醋酸饱和液；②3%过氧化氢溶液。 （3）测定方法取被 检尿液3 —5毫升，置洁净试管中煮沸，以破坏其他可能存在的过氧化物酶。冷却厉加入联苯 胺冰醋酸饱和液数滴，再加3%过氧化氢溶液数滴，混合，数秒钟后即可呈现反应。 （4）结果 判定 若供检尿呈绿色或蓝色，为阳性反应，颜色的深度（绿、蓝绿、蓝色、深蓝），可表示反应 的强弱什、++、+++、++++ ）。若5分钟后仍不变色，则为阴性反应。 2?粪中的潜血检查粪 便屮潜血阳性，见于胃溃疡、胃穿孔及胃肠道的出血性疾病。 （1）原理与试剂与尿的潜 血检查相同。 （2）测定方法取洁净棉签两根,滴以生理盐水，一支棉签上涂粪，另一支作对 照，均置酒精灯上加温片刻，以破坏可能存在的儿种过氧化物酶。待冷，各加1%联苯胺冰酣酸 溶液及3%过氧化氢液各2滴，观察颜色出现的快慢及深浅。（3）结果判定如果涂粪棉签呈 蓝色，而对照棉签颜色不变,为阳性反应；假若两支棉签均呈蓝色，为假阳性反应；若两支棉签 均不变色,为阴性反应。 检验结果,可按以下规定记录： 加试剂后立即出现深蓝或深 绿色者为最强阳性反应（++++）。 加试剂后初现浅蓝色，半分钟内渐现深蓝或深绿色者, 为强阳性反应什++）。 加试剂半分钟后，在1分钟内出现绿蓝色者，为阳性反应什+） 加 试剂1分钟后，在2分钟内出现绿色者,为弱阳性反应（+）。 加试齐屹分钟后，在5分钟内缓缓 出现浅绿色者，为痕迹反应（土）。 若5分钟后仍不出现浅蓝色或浅绿色者，为阴性（一）。. 3?粪便的显微镜检查本法足借助显微镜观察检查粪便中的寄牛虫虫卵和幼虫，同时也可了 解到被检猪的消化能力和胃肠道有无炎症病变。 （1）直接涂片法 取洁净载玻片1片，先滴 1大滴生理盐水（若用50%廿油水溶液更好）,再以竹签挑取被检粪便少许，与载玻片上的生理 盐水混匀，涂成薄层，即可镜检。 本法简便易行，常用于检杳粪便中有无寄生的蠕虫卵，由 于取粪量很少，检出率较低，所以耍求每个样品多涂几片（5 — 6片）。若在涂片屮同时见到多 量的红细胞和白细胞，则表示肠道有炎症。 （2）饱和盐水浮集法先制备饱和食盐溶液，即 在1000毫升沸水中加入食盐380克，冷却后用纱布过滤备用。检查时，取5 — 10克猪粪，加入20 倍量的饱和食盐溶液，搅拌溶解厉用纱布滤入另一烧杯中，去掉粪渣，静置30-60分钟,使比重 小于饱和食盐溶液的虫卵浮集于液血上，然后用直径0.5 —1厘米的铁丝圈平行接触液血,使铁 圈屮形成一个薄膜,将其抖落于载玻片上，加盖玻片后，先用低倍镜观察,再转到高倍镜检查。 本法也不复杂，采用民虫卵比重大的盐水使虫卵集中浮在液体的表层，检出率较高，尤具对线 虫卵检出效果较好。 猪的几种寄牛虫卵在显微镜F的形状，参见图1 （二）猪的血 液常规检查法 血液常规检查的项冃有多种，但是目前用于猪病诊断的项H不多，常用 的有血红蛋白含量测定、红细胞计数、白细胞计数等。必须指出的是,血液常规检查仅仅是 为临诊诊断提供一些数据,是一种辅助诊断手段，在操作时要严格遵循操作规程和注意事项， 力求准确，避免差错,同时应?临诊检查密切结合，才能得到正确的结论。 1?血红蛋白含量 测定 健丿隶猪的血红蛋口值为10.5克/100毫升（变动范围9.5?12.0,若是血红蛋口的含量增多，见 于各种原因引起的血液浓缩，如剧烈的腹泻、呕吐、出大汗及某些中毒病。血红蛋白含量降 低?见于仔猪贫血及各种慢性消耗性疾病?如慢性猪瘟、仔猪州虫病等。 ⑴器械和试剂① 国产萨利氏血红蛋Aih②0」摩/升（1%—2%）盐酸溶液。 ⑵方法①于测定管内加入0.1 燃/升盐酸溶液至白分数刻度的”20”处（约5—6滴）。②用血红蛋白吸管吸取供检血液至20（或 i（））立方毫米处，用清洁脱脂棉拭净血红蛋白吸管尖端外壁附着的血液，迅速将血红蛋ri吸管 插入测定管底部的盐酸溶液屮,缓缓压出血液，并以此盐酸溶液反复洗净管内所附着的血液。 以玻棒充分搅拌，使供检血与盐酸溶液充分混合，静置10分钟。④沿管壁向测定管内逐滴加 入蒸馆馆水（或N/10盐酸溶液），随加随用玻棒搅拌，并少两侧的标准色柱相比较，直至管内液 体的颜色与标准色柱一致为止。⑤读取测定管内液体凹面的刻度数，■即100毫升血液屮所含 血红蛋白的克数或百分数。如被检血的用量只达血红蛋白吸管的刻度”10”处时,将读数加倍。 （3