trpc6在足细胞的表达及其与足细胞损伤修复相关性研究内科学专业论文.docxVIP

缩略语表英文全称或缩写 缩略语表 英文全称或缩写 中文 1．transient receptor potential， 瞬时受体电位 TRP transient receptor potential 瞬时受体电位阳离子通道蛋白6 cation channel 6，TRPC6 3． podocyte 足细胞 4． mouse podocyte clone 5，MPC5 小鼠足细胞系5 5． minimal change nephritic 微小病变型肾病综合症 syndrom，MCNS focal glomerular sclerosis，FGS 局灶性肾小球硬化 L nephritic syndrome，NS 肾病综合征 乱 idiopathic nephritis syndrome 黑人特发性肾病综合征 钆 End—stage renal disease，ESRD 终末期肾病 m slit diaphragm，S D 裂孔隔膜 ¨ signaling complex 信号传导复合物 他 cytochalasin D 细胞松解素D B Captopril 卡托普利 H Dexamethasone 地塞米松 ：2 puromycin aminonucleoside， 嘌呤霉素核苷酸 PAN 16． a11．trans retinoic acid，ATRA 全反式维甲酸 17． RT—PCR 反转录酶一聚合酶链反应 18． Western blotting 免疫蛋白印迹 19． SDS-polyacrylamidedel gel SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳 electrophoresis， SDS—PAGE 独创性声明 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地 方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含 为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。 与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明 确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：叁鹾 签字嗍：逊年尘，j乒lI 学位论文版权使用授权书本学位论文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保留、使 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保留、使 用学位论文的规定，同意大连医科大学保留并向国家有关部门或机构 送交学位论文的复印件和电子版，·允许论文被查阅和借阅。本人授权 大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库 进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论 文。 论文作者签名 指导教师签名 签字日期： 避年』月孕tq TRPC6在足细胞的表达及其与足细胞损伤修复相关性研究 TRPC6在足细胞的表达及其与足细胞 损伤修复相关性研究 硕士研究生： 姚 琴 指导教师： 赵久阳 教授 指导小组： 刘春艳 副教授 徐茂兰 副教授 专业名称： 内科学 摘 要 目的：足细胞的裂孔隔膜(slit diaphragm，SD)是肾小球滤过屏障 的关键组成部分，新近发现的裂孔隔膜蛋白ll2】瞬时受体电位阳4离子通道 蛋白6(transient receptor potential cation channel 6，TRPC6)是一个非选 择性阳离子通道蛋白，它与Nephrin、Podocin等重要的裂孔隔膜分子共同 组成一个信号传导复合物(signaling complex)以维持足突及裂孔隔膜结 构和功能的完整性。本文旨在探讨TRPC6蛋白在小鼠足细胞系MPC5 (mouse podocyte clone 5，MPC5)的表达及其表达变化与足细胞损伤、 修复的相关性。 方法： 1、条件永生型小鼠足细胞系MPC5培养：根据文献[31将复苏MPC5 细胞。于33℃中增殖培养，平均3～4天达80％以上融合传代。换于37℃ 中培养，1 0～1 4天分化为成熟，此时为分化态MPC5，用于实验； 2、通过反转录酶一聚合酶链反应(RT—PCR)、 免疫蛋白印迹 (Western blotting)检测TRPC6在分化态MPC5的表达； 3、TRPC6与足细胞骨架蛋白关系研究：将分化态MPC5分两组，正 常对照组(组1)不做任何处理，细胞松解素处理组(组2)加细胞松解 素D(eytochalasin D) (2．5 Ismol／mL)作用6,b时，用Western blotting 方法检测两组TRPC6的表达量： 4、TRPC6与足细胞损伤及修复研究：建立正常对照组，嘌呤霉素核 苷酸(PAN)肾病足细胞模型组，地塞米松干预组(0．01 I_tmol／L，7 d)， 卡托普利干预组(1 0 I-tmol，