臭氧对口腔综合治疗台水道系统中hbv灭活效果的实验研究口腔医学口腔临床医学专业论文.docxVIP

天津医科大学硕士学位论文中文摘要 天津医科大学硕士学位论文 中文摘要 目的：探讨能够限时灭活口腔综合治疗台水道中乙肝病毒的最低臭氧溶液 浓度。拟用多种方法控制溶液的臭氧浓度的稳定，将配制的不同浓度臭氧溶液 同人肝癌细胞系(HepG2)的2．2．15细胞共同培养后提取其上清液，聚合酶链式 反应(PCR)扩增，荧光定量(FQ．PCR)检测HVB．DNA的浓度，对各浓度臭 氧溶液的灭活效果进行比较。并观察并不同浓度臭氧溶液对正常口腔上皮细胞 的影响。为臭氧在DUWLs的感染控制的临床应用提供理论基础。 方法：1、臭氧溶液的配置与浓度衰减实验； 2、HepG2．2．15细胞的培养：常规培养HepG2．2．15细胞； 3、不同浓度的臭氧溶液对HepG2．2．15细胞株表达物的作用； 4、臭氧溶液对正常口腔组织的细胞形态学及细胞毒性实验； 5、统计学分析：采用单因素方差分析统计学方法，两组组间比较采用SNK—q 检验。 结果：1、不同封闭条件和放置时间的臭氧浓度变化：臭氧溶液放置30 min 后，各组浓度变化差异有统计学意义(庐9．77，P0．01)。在密封条件下，水温为 5℃和水温为10℃时臭氧浓度比较差异无统计学意义(口=1．36，P0．05)；密封条 件下，水温为5℃与水温20V时臭氧浓度比较差异有统计学意义(q=4．88， P0．01)。水温为5℃时，密封和非密封臭氧浓度差异无统计学意义 (q=0．59，P0．05)；水温为20℃时，密封和非密封臭氧浓度差异有统计学意义 (q_-3．37．尸O．01)。 2、臭氧溶液对HepG2．2．15细胞上清液中HBV-DNA含量PCR荧光结果示： 臭氧溶液能够明显减少HepG2．2．15上清液中HBV-DNA含量。相同时间内不同 浓度臭氧溶液对HBV-DNA含量的影响不同，臭氧溶液浓度越大，其对 HepG2．2．15细胞HBV-DNA的表达抑制越明显。 3、细胞培养上清液中HVB．DNA检测结果：臭氧溶液组比超纯水对照组 HBV-DNA量明显降低。在臭氧作用l min时，臭氧浓度为1．5 mg／L组和其他各 组相比，差异均有统计学意义(均P0．01)；臭氧分别作用5、10、15、30 min 时，各组臭氧溶液均能降低HVB—DNA含量，超纯水组和其他各组间差异有统 计学意义(均P0．01)；臭氧作用15 min后，臭氧溶液各组间差异无统计学意义 (均P0．05)。 天津医科大学硕士学位论文4、臭氧溶液对Hela细胞作用的细胞的形态学观察：经倒置显微镜检测Hela 天津医科大学硕士学位论文 4、臭氧溶液对Hela细胞作用的细胞的形态学观察：经倒置显微镜检测Hela 细胞贴壁生长呈星形，棱形，细胞形态良好，胞体透亮，呈典型贴壁不规则形 态，加入低浓度(0．5mg／L、O．6mg／L)臭氧溶液后，对细胞形态无明显影响， 加入中浓度(1．5mg／L)臭氧溶液后细胞出现颗粒，有少部分胞体变小，提示 细胞状态受到一定程度影响。加入甲醛甲酚溶液后细胞形态明显破坏，出现大 量细胞碎片，提示细胞大量死亡，破坏严重。 5、臭氧溶液对细胞增殖的影响：MTT结果显示，阴性对照组同低浓度臭氧 溶液组(O．5mg／L、0．6mg／L)细胞相对增殖率均在100～103％之间，毒性评级 为0级，其他1组中浓度臭氧溶液(1．5mg／L)细胞相对增值率在75％---99％之 间，毒性评级为1级。阳性对照组的细胞相对增值率在1～24％之间，毒性评级 为4级，3组臭氧溶液的安全性为合格。 结论：1、水温、容器是否密闭都会影响臭氧浓度，水温越高臭氧浓度变化 越快，容器密闭时，臭氧浓度稳定。 2、臭氧溶液能够有效的灭活HBV-DNA，并且臭氧浓度越高，其对 HBV-DNA的灭活作用越强。臭氧浓度为0．6 mg／L 10 min及0．5 mg／L 15 min能 将设定浓度的HVB．DNA灭活。 3、3、0．5 mg／L、0．6 mg／L的臭氧溶液对口腔正常组织无毒性作用，可以 应用于DUWLs的消毒。 关键词：口腔综合治疗台水道系统乙肝病毒臭氧荧光定量聚合酶链式反应 消毒生物膜交叉感染 天津医科大学硕士学位论文Abstract 天津医科大学硕士学位论文 Abstract Objective：To study different concentrations of ozone solution which active on the Hepatitis b virus(HBV)in dental unit waterlines(DUWLs)and find out the minimum ozone water concentration which can inactivate HBV in DUWLs．This experiment