肝细胞性肝癌中端粒酶与肿瘤抑制基因p53相关性研究病理学专业论文.docxVIP

野细醺性酐癌串端粒酶岛肿瘤抑觏基函p53抽关性研宽 野细醺性酐癌串端粒酶岛肿瘤抑觏基函p53抽关性研宽 尹戈描喜 中支援要 肝细胞性肝癌中端粒酶与肿瘸抑制基因p53相关性研究 目的 研究端粒酶／hTERT(human telomerase reverse transcriptase)在人肝细胞肝癌(HCC)发囊、发菔中的意义， 探讨其表HCC诊断中的价值；观察肿瘤抑制基因p53对人肝 癌缎施端粒酶及英维化鼗单位hTERT的影响，娃期为以端粒 酶／hTERT为靶点的肿瘤治疗提供实验依糖。借料与方法 用 PCR—ELISA、TRAP一银染、RNA—RNA较酸原位杂交、RT—PCR和 免疫组化／细胞化学方法检测人肝组织(HCC、癌旁和正常肝 组织)及俸好新癌细胞(HCC-9204和SMMC一7721)申端粒酶 活性／hTERTmRNA和p53表达状况：用脂质体介导基因转染 法将人野生型p53基因(pCMV—Script-p53)导入前迹肝癌 细胞中，经WeStern b10t和RT—PCR鉴定转染效率，检测p53 转絷后赣粒酶活性／hTERTmRNA交亿，双疑bc卜2、p2lWAFl 蛋白和凋亡改变。 结果 1．HCC组织中端粒酶活性、 hTERTmRNA 鞠性裣出率分粕为 81．3％(26／32)和 87．5％(28／32)，远离于癌旁肝组织(均为12．5％，4／32)， 正常肝组织为翻拄，两者表述岛薜瘸大小、分化程穗和侵袭 状况有关：2．HCC申p53蛋白阳性率为75％(26／32)，其 分耷与hTERTmRNA基本一致，癌旁和正常肝均为鞠性；3． HCC一9204和SMMC一772l细胞端粒酶活性和hTERTmRNA均量 稿，跨表运，p53转染后两者均鞠显受抑；问对bc卜2蛋白表 达下降，细胞黧现凋亡改变；p2lWAFl表达及细胞周期分枣 无绢显变亿。j结论 1．端粒酶活性、hTERTmRNA表迭在HCC 中的高检出率以及与某些肿瘤特征的密切关系，提示hTERT 原缓裣测可望成为HCC早期诊断和预后判断的有用指标；2． p53失活、端粒酶活化／hTERT表达共同参与HCC发生发展过 程：3．端粒酶／hTERT活亿表达存在p53依赖憾调控途径， 但与p2lWAFl苑关： 4．野生型p53基因转染能抑制艟瘤纽 胞端粒酶活性／hTERTmRNA表达和引起细胞凋亡，为肿瘤基 因治疗提供馥依据。 关键词：肝细胞肝癌 端粒酶hTERT p53 酐细胞性肝癌中端粒辞与胂痞挣翻基西p53 酐细胞性肝癌中端粒辞与胂痞挣翻基西p53 Y譬；f-性研究 姜文捞毒 Abstract Relationship between telomerase and tumor suppressor gene p53 in human hepatocellular carcinoma Objective To search the significance of telomerase／hTERT(human telomerase reverse transcriptase)in hepatocellular carcinoma (HCC)carcinogenesis and to explore the value in diagnosis：to investigate the effect of tumor suppressor gene p53 on the activitv of telomerase／hTERT for offering the experimental data about telomerase／hTERT as a molecular target in tumor suppression with gene therapy． Materials and Methods With PCR-ELISA， TRAP-siiver staining， in situ hybridization and immunohisto／cytochemistry。the expression of telomerase／hTERT and p53 were detected in both human 1iver tissues(including HCC and corresponding non—cancerous area as well as normal l iver tissue)and HCC cell 1ines(HCC一9204，SMMC一7721)：1ipofectin- mediated gene transfectio