烟草硼内向转运体NIP5;1的克隆和表达分析.pdf

中国农学通报 2016,32(21): 100-105 Chinese Agricultural Science Bulletin 烟草硼内向转运体NIP5;1的克隆和表达分析 1 2 1 石永春 ，郭 尧 ，薛瑞丽 1 2 （河南农业大学生命科学院，郑州450002 ；郑州外国语学校，郑州450002 ） 摘 要：为研究烟草中的硼转运机制，克隆了烟草硼内向转运体基因，并分析其表达特点。采用生物信 息学的方法预测烟草硼内向转运体的开放阅读框，并通过PCR 的方式克隆后测序验证；其相应蛋白质 的结构特点亦用生物信息学手段分析。该基因在烟草不同组织和对不同处理响应的表达差异采用半定 量RT-PCR 的方法检测。结果显示克隆到烟草硼内向转运体NtNIP5; 1 的开放阅读框，全长894 bp ，编码 297 个氨基酸，具有MIP 家族典型的结构域HLNPSLTIA ，GenBank 登录号为KF611892。其蛋白质的二 级结构以α-螺旋为主，有5 个跨膜结构域。RT-PCR 结果发现，NtNIP5; 1在根和叶中均有表达，但在叶中 表达水平较高；6-BA、SA和ABA 均可抑制其表达。 关键词：烟草；NIP5; 1；硼转运；基因表达 中图分类号：Q781 文献标志码：A 论文编号：cas CloningandExpressionAnalysisofBoronInfluxTransporterNIP5;1fromNicotianatabacum ShiYongchun,GuoYao,XueRuili1 2 1 1 (LifeScienceCollege,HenanAgriculturalUniversity,Zhengzhou450002; 2ZhengzhouForeignLanguageSchool,Zhengzhou450002) Abstract:Tounderstandthemechanismofborontransportationintobacco,theboroninfluxtransportergene wasclonedin Nicotiana tabaccum, anditsexpressionwasanalyzed.Theopenreadingframe(ORF)ofboron influxtransporterwaspredictedbybiologyinformaticsmethods,andclonedbyPCRtechnique,verifiedby sequencing.Itsstructurewasalsopredictedbybiologyinformaticsmethods.Semi-quantitativeRT-PCRwas usedtomonitoritsexpressionlevelsindifferenttissuesoftobaccowithdifferenttreatments.Resultsshowed thatthecompleteORFsequenceoftobaccoinfluxborontransporter,NtNIP5;1wascloned.ItsORFcontained 894 bp,encoded 297 aminoacidsandincludedMIPproteinsignaturesequenceHLNPSLTIA.GenBank accessionnumberwa