蓝色琼脂糖重力柱.PDFVIP

色琼脂糖重力柱 产品编号：C500089 产品规格：1 mL/Column 产品简介 此重力柱是以蓝色琼脂糖为亲和为填料，该填料用Sepharose 6 FF 与Cibacron Blue F3G-A 通过三嗪基相连，由于它有着NAD+ + and NADP 之类的辅助因子有着相似的结构，所以可以用亲和纯化一些激酶，脱氢酶和一些需要腺苷作为辅助因子的酶，通常用 于白蛋白、干扰素、 2- 巨球蛋白、凝血因子和核酸结合蛋白等的纯化，具有较高的稳定性和很好的再生性能。 产品特征 Resin volume 1 mL/column h Ligand 3 mg/mL gel or 5 umol Cibacron blue F3G-A/ml drained gel Binding capacity 10 mg HSA/mL gel c Particle size range 45~165 μm e Bead structure Highly cross-linked spherical 6% agarose t Recommended flow rate 1 mL/min ( 1 ml) (max:4 mL/min) pH stability 4~12(long time), 3~13(short time) o i Storage temperature +4°C to +8°C Storage buffer 20% 乙醇 B Compatible reagents 8 M urea ,6M guanidine hydrochloride Imcompatible reagents Tween-20 and similar detergent in binding buffer will reduce binding capacity for albumin n 运输及保存条件 o 冷藏运输，4°C 保存，不可冻存，保质期两年。 g 实验前准备 n 如果用于纯化白蛋白，可以使用如下缓冲液： l Binding/Wash buffer: 50 mM KH2PO4, pH 7.0 a l Elution buffer: 50 mM KH2PO4, 1.5 M KCl, pH 7.0 如果用于干扰素 ß，可以使用如下缓冲液： S l Binding/Wash buffer : 0.02 M phosphate, 0.15 M NaCl, pH 7.2 l Elution buffer 2: 0.02 M phosphate, 2 M NaCl, 50 % ethylene glycol, pH 7.2. l 对于用于其它蛋白质或酶的纯化，请查找相关的文献资料或进行条件摸索，以寻求较好的结合和洗脱条件，提高目的蛋白质 的纯度和产量。 纯化步骤 1. 将柱子垂直固定在铁架台上，移去重力柱的上下盖，让柱中的保存液流干，用5 倍胶体积的20%酒精洗涤柱料，再用5 倍 胶体积的2 M NaCl 洗涤柱料，然后用 5 倍胶体积的Binding/Wash buffer 柱料，使的未于琼脂糖结合的染料被彻底洗尽， 同时流出的Binding/Wash buffer 在A280 的吸收值几乎为零。 2. 对于比较浑浊的样品，请预先用0.22~0.45 μm 的滤膜进行过滤，将澄清的样品溶液与10 倍体积的Binding/Wash buffer 相 混合，再将混合液加入到柱中，收集并保留流出液，以待分析。 3. 用八倍体积的Binding/Wash buffer ,洗涤柱料,直到流出的Binding/Wash buffer 在A280 的吸收值几乎为零。 4. 加入2~3 ml 的Elution