红藻糖苷对超低温冻存微藻的保护作用.pdf

第 4 0 卷 第 5 期 水 生 生 物 学 报 Vol. 4 0, N o. 5 2 0 1 6 年 9 月 ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA S e p., 2 0 1 6 doi: 10.7541/2016.132 红藻糖苷对超低温冻存微藻的保护作用 李九零 周成旭 蒋 莹 严小军 陈海敏 (宁波大学浙江省海洋生物工程重点实验室, 宁波 315211) 摘要: 为研究红藻糖苷对超低温冻存微藻细胞的保护作用, 研究将3种不同的微藻置于含10% DMSO和不同浓 度红藻糖苷的冻存液中, 冻存并解冻后, 以流式细胞仪检测细胞存活率, 测定复养后藻株的生长曲线及相关生 理参数。结果显示, 由于冷冻损伤, 冻存后各种藻细胞的生长速率、细胞密度及生理指标都显著性下降, 而红 藻糖苷协同DMSO能够显著增加细胞的存活率, 尤其15%红藻糖苷能将紫球藻存活率提升20% (P0.05); 生长 曲线得到明显改善; 且对PSII最大光能转化效率也有显著性提高(P0.05) 。总体结果来看, 红藻糖苷对超低温 冻存微藻, 特别是紫球藻具有明显的保护作用, 且效果强于蔗糖。 关键词: 红藻糖苷; 海洋微藻; 超低温冻存; DMSO 中图分类号: Q-33 文献标识码: A 文章编号: 1000-3207(2016)05-1020-05 [6] 近年来, 微藻在能源、保健品、动物饲料等领 量报道指出红藻糖苷具有抗氧化 、保护细胞失 [7] 域都有非常广阔的应用价值和前景, 越来越多的被 水、保护蛋白质等大分子 的多种作用。由于其来 商业开发。传统的微藻种质的保存方法较繁琐, 且 源于海洋藻类, 对微藻有非常好的相容性, 并且具 细胞的污染和变异几率大, 容易造成宝贵种质的丢 有玻璃态形成、大分子保护、抗氧化性和抗渗透 [1] 压功能, 因此, 非常适宜于细胞的冻存。 失 。超低温冻存技术是一种在极低温度下有效长 期保藏有价值种质资源的技术, 已经成为传统方法 本实验将红藻糖苷作为非渗透性CPA 结合 [2] DMSO应用到3种不同微藻的超低温冻存中, 检测 最强大的替代方法 。 冻存保护剂(Cryoprotective Additives, CPA)是 其对微藻存活率、生长曲线以及生理指标的影响, 超低温冻存的关键因素, 主要通过减少细胞内冰晶 为微藻超低温冻