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授课对象:11 级检验1-5 班
课 时:2 学时
血清尿酸 (UA )测定
——磷钨酸还原法
【实验目的】
1.掌握磷钨酸还原法测尿酸的原理及注意事项
2.规范地进行尿酸测定,正确地使用离心机
3.了解血清尿酸测定的临床意义
【实验用品】
离心机、洗耳球、722 型分光光度计、磷钨酸贮存液、磷钨酸应用液、钨酸
试剂、10%碳酸钠溶液、尿酸标准贮存液(6mmol/L )、尿酸标准应用液(0.3mmol/L )
【实验原理】
血清去蛋白滤液中的尿酸,在碱性溶液中被磷钨酸氧化生成尿囊素和二氧化
碳,磷钨酸被还原为蓝色的钨蓝。钨蓝的生成量与尿酸浓度成正比。
【操作步骤】
加入物 (ml ) U S B
UA 标准液 - 0.5 -
血 清 0.5 - -
蒸馏水 - 0.5
钨酸试剂 4.5 4.5 4.5
充分混匀,静置数分钟。R 离心,另取3 支试管编号
U 管上清液 2.5 - -
S 管上清液 - 2.5 -
B 管上清液 - - 2.5
10%碳酸钠 0.5 0.5 0.5
混匀,室温下放置20min ,波长660nm 比色
【计算】
Au
血清尿酸μmol/L ×300
As
【参考范围】
男:149~416μmol/L
女:89~357μmol/L
【临床意义】
1.高尿酸血症与痛风
(1 )尿酸排泄减少:见于原发性肾功能不全、药物引起的尿酸潴留 (如各
种利尿药、水杨酸及抗结核药能抑制肾小管分泌尿酸)、铅中毒、铍中毒、氯仿
中毒以及甲状腺功能亢进 (可引起肾小管功能受损)、酸中毒 (与尿酸竞争肾小
管上皮细胞主动分泌机制)。
(2 )嘌呤代谢亢进:见于多发性骨髓瘤、红细胞增多症、地中海贫血、传
染性单核细胞增多症等,由于核蛋白转换率增快,使尿酸生成过多。
有的高尿酸血症既由于尿酸合成增多,又由于肾排出尿酸减少。如慢性酒精
中毒、妊娠高血压综合征等。
2.低尿酸血症
(1 )尿酸生成过少:见于黄嘌呤尿症 (由于先天性黄嘌呤氧化酶缺乏,使
尿酸不能正常生成,故患者血与尿酸水平很低,而排出大量黄嘌呤和次黄嘌呤),
服用别嘌呤醇类药物(使嘌呤氧化酶抑制或假性反馈抑制嘌呤生物合成,从而阻
断尿酸生成,出现低尿酸血症,伴有尿中尿酸排出减少和黄嘌呤排出增多)。
(2 )肾排出尿酸过多:见于 Fanconi 征 (先天性肾小管疾患,使肾小球滤
液中尿酸不能被重吸收)、大剂量应用阿司匹林、可的松、和 ACTH (可抑制肾
小管对尿酸的重吸收和增加肾小管的分泌,使尿酸的清除增加)。
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