人教版高中生物选修1 专题五 课题1 dna的粗提取与鉴定 名师公开课省级获奖课件(41张).ppt

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人教版高中生物选修1 专题五 课题1 dna的粗提取与鉴定 名师公开课省级获奖课件(41张)

结 束 首 页 末 页 下一页 上一页 结 束 首 页 末 页 下一页 上一页 析出 溶解 DNA 0.14 mol/L的NaCl溶液 2 mol/L的 NaCl溶液 溶解规律 项目 ①DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同; ②选择适当的盐溶液就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的 总结 溶解 部分发生盐析沉淀 蛋白质 0.14 mol/L的NaCl溶液 2 mol/L的NaCl溶液 溶解规律 项目 ①NaCl溶液为2 mol/L时,DNA溶解,而部分蛋白质发生盐析生成沉淀,通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于NaCl溶液的杂质;②当NaCl溶液稀释至0.14 mol/L时,DNA析出,过滤可除去溶于NaCl溶液的部分蛋白质和其他杂质 溶于NaCl溶液中并稀释 DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同 目的 方法 基本原理 鉴定DNA 加入二苯胺,并沸水浴加热 DNA可被二苯胺染成蓝色 DNA析出,除去溶于酒精的蛋白质 加入冷却酒精(95%) DNA不溶于酒精溶液 嫩肉粉中含木瓜蛋白酶,分解蛋白质 加入嫩肉粉 DNA不被蛋白酶所水解 目的 方法 基本原理 溶解DNA,过滤除去不溶的杂质 向上述滤液中加入NaCl,使NaCl溶液物质的量浓度为2 mol/L,并用玻璃棒沿一个方向搅拌,然后过滤 溶解DNA 使细胞因过度吸水而破裂,释放核物质 在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,并充分搅拌,过滤后收集滤液 提取细胞核物质  防止血液凝固,使血细胞与血浆分离 每100 mL血液中加入3 g柠檬酸钠,然后静置或离心,除去上清液 制备鸡血细胞液  目的 实验操作 步骤 除去溶于酒精的杂质,获得较纯净的DNA 向上述滤液中加入等体积的体积分数为95%的冷却酒精溶液,待出现丝状物时用玻璃棒沿一个方向搅拌,将丝状物卷起 提取较纯净的DNA 溶解DNA,过滤除去杂质 将纱布上的黏稠物放入2 mol/L的NaCl溶液中,搅拌至完全溶解,然后过滤 DNA的再溶解 使NaCl溶液的浓度降至0.14 mol/L,析出DNA,过滤除去溶于该浓度的NaCl溶液的杂质 向上述滤液中缓缓加入蒸馏水并 轻轻搅拌,至白色丝状黏稠物不 再增加时停止加水,然后用多层 纱布过滤 析出DNA 目的 实验操作 步骤 DNA在沸水浴条件下,遇二苯胺会变成蓝色 实验结论 不变色 变蓝 实验现象 沸水浴5 min 4 加4 mL二苯胺混匀 3 — 加DNA丝状物溶解 2 加入2 mol/L的NaCl溶液5 mL 1 B A 试管 序号   去除不溶于 2 mol/L NaCl 溶液的杂质 去除溶于 0.14 mol/L NaCl溶液的杂质 去除不溶于 2 mol/L NaCl溶液的杂质 去除细胞膜、核膜等杂质 过滤目的 NaCl溶液 蒸馏水 NaCl溶液 蒸馏水 过滤前加入的物质 不溶于 2 mol/L NaCl 溶液的杂质 DNA 不溶于 2 mol/L NaCl溶液 的杂质 细胞膜、 核膜等残片 纱布上 DNA 溶于0.14 mol/L NaCl溶液的杂质 DNA 含DNA 的核物质 滤液中 第四次过滤 第三次过滤 第二次过滤 第一次过滤 结 束 首 页 末 页 下一页 上一页 结 束 首 页 末 页 下一页 上一页

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