NT4-ADNF9融合基因原核表达载体的构建-.PDFVIP

第 卷第 期 西 安 交 通 大 学 学 报 (医 学 版 ) 24 5 Vol.24No.5 年 月 ( ) 2003 10 JournalofXianJiaoton Universit MedicalSciences Oct.2003 g y 融合基因原核表达载体的构建 NT4-ADNF-9 1 2 1 3 3 郑国玺 ,杨 宇 ,朱宏亮 ,王全颖 ,杨广笑 ( 西安交通大学第二医院耳鼻喉科,陕西西安 ; 吉林大学第一医院神经内科,吉林长春 ; 1. 710004 2. 130021 西安华广生物工程有限公司,陕西西安 ) 3. 710025 摘要:目的 构建神经营养素( )与活性依赖性神经营养因子 ( )融合基因的原核表达载体 / NT4 -9 ADNF-9 BV220 p ,为进一步对神经系统退行性疾病基因治疗的研究奠定基础。方法 采用非对称互补引物/模板法,制 NT4-ADNF-9 备两端含有酶切位点的 的 ,将其连接到 的信号肽和前导序列的 端,组成融合基因 ADNF-9 cDNA NT 3 NT4-ADNF- ,再将该融合基因亚克隆于原核表达载体 ,构建为 / 。结果 经 测序,限制性内切 9 BV220 BV220 NT4-ADNF-9 DNA p p 酶酶切等方法证实已成功地将 重组到 信号肽和前导序列的 端,并将融合基因亚克隆于 内。 ADNF-9 NT4 3 BV220 p 结论 成功构建了 与 融合基因的原核表达载体 / 。 NT4 ADNF-9 BV220 NT4-ADNF-9