通过减慢传导速度.PDFVIP

缝隙连接抑制剂庚醇在不影响负极性能和不应期的情况下，通过减慢传导速度， 增加室性心律失常 摘要：本研究运用 Langendorff 灌注的鼠心来探讨缝隙连接抑制剂庚醇的致心 律失常作用，在右心室起搏期间，从左心室心外膜获得单相动作电位。在运用 8Hz 起搏期间，给予庚醇前后来研究 12 只心脏的常规活动，通过对比观察到运 用庚醇处理后，运用 S1S2 刺激 12 只心脏中有 6 只出现了心律失常，庚醇的致 心律失常作用与增加激活潜伏期和减慢传导速度有关，但并不改变 APDS （APDX，X=70%，90%，50%，30%）及ERPS。致兴奋波长减小，但是兴奋间 期并不改变，总之，这些发现证明单独使用低浓度缝隙连接抑制剂庚醇能够减 慢传导速度，运用期前刺激通过减小兴奋波长 λ足以诱发室性心律失常，因此 出现了心律失常。 前言 心脏动作电位有序传播是正常的电活动的关键，其中断可能会导致心律失 常。前‑临床模型实验运用遗传学和药理学方法，更好的理解潜在的致心律失常 的电生理学机制。小鼠模型实验突出了缝隙连接对于心室传导和心律失常的作 用，但是结果一直存在争议。杂合子小鼠 Cx43 + /‑证明能使Cx43 的表达减少 45‑50%，然而，传导速度（CV）减慢的程度是可变的：Cx43 的表达减少 23‑44%，传导速度是不变的（25‑30）或减少。另外运用药理学方法，运用 2mM 庚醇证明了室性心律失常与减慢传导速度相关联。本药剂浓度高达 1‑2mM 抑 制缝隙连接，然而浓度≥2mM此外还抑制钠通道。在何种程度下，观察到的传 导阻滞和心律失常可以归因于缝隙连接耦合缺失仍然需要被阐明。 因此，本研究的目的是探讨异常缝隙连接在室性心律失常中的作用，针对 缝隙连接运用低浓度庚醇（0.05mM）。结果发现运用这一浓度在正常起搏下庚 醇并没有引起自发性心律失常，然而在 S1S2 起搏下增加了室性心动过速的发生 率。这与增加激活潜伏期，但并不改变 APDS 和 ERP 有关。本研究的结果表明， 缝隙连接的缺失足以致使传导减慢，导致室性心律失常。 材料和方法 液体 实验运用 K-H 液 (液体组成 mM：NaCl 119, NaHCO3 25, KCl 4, KH2PO4 1.2, MgCl2 1, CaCl2 1.8, 葡萄糖 10 and 丙酮酸钠 2; pH 7.4 ）：加入碳 酸氢盐缓冲液同时充盈 95% O2/5% CO2 气体。庚醇在水溶液中可溶的直到 9 mM ，运用K-H 液稀释直到最终的浓度是 0.05mM. 准备 Langendorff 灌注的小鼠的心脏 13 只野生鼠用于目前的研究（5 到 7 个 月，3 只雄性，10 只雌性，体重 39.2±1.9 g)。室温 (21±1˚C) ，经历 12h：12h 昼夜循环，自由进食无菌的水分和食物。这里描述的实验遵从 1986 年美国动物行为。本研究通过动物福利院以及剑桥大学伦理审查机构的批 准。实验过程准备 Langendorff 灌注的鼠心如下：大鼠颈椎脱臼法处死，心脏 立即离体，淹没在 K-H 液的冰水中。主动脉插管，使用微动脉瘤夹，心脏被牢 固地附在灌注系统上。运用蠕动泵，逆行灌注速度是 2‑2.5 mL/min，灌流液通 过 200 和 5μm 过滤器，连续加热到 37˚C，通过水套和环行器到达主动脉。心 恢复粉红色以及自发节律性活动，开始进一步研究（90%），剩下的 10%被丢弃。 灌注心脏电生理研究前，灌注 20 分钟减少儿茶酚胺内源性释放的任何残余。 刺激方案 使用双铂电极（电极间距 1 毫米）放置在右心室心外膜基底行电刺 激。灌注开始后立即将刺激电压设置为舒张期阈值，持续时间 2ms，8HZ，方波 脉冲。采用 S1S2 程控电刺激（PES）来评估心律失常。包括8 个 125 毫秒基本 周长（BCL）的S1 刺激，其次是第九个早博刺激 S2。S1S2 间期的第九个刺激持 续以 1ms 减少，直到心律失常诱发，而 S2 刺激不引起任何反应。 记录程序 运用 MAP 双极电极于左心室心外膜获得 MAP。以相隔0.25mm 自制 聚四氟乙烯的心内膜 MAP 电极，去除电极的尖端。心内膜电极通过室间隔随之 固定于左心室腔侧壁。刺激电极和记录电极的位