猪口蹄疫3ABC抗体IgG诊断试剂盒酶联免疫法.DOCVIP

上海瓦兰生物科技有限公司 订购电话：021 传真：021猪口蹄疫3ABC抗体（IgG）诊断试剂盒（酶联免疫法） 说明书 【产品名称】 通用名称：猪口蹄疫3ABC抗体（IgG）诊断试剂盒（酶联免疫法） 英文名称：Porcine Foot-and-Mouth Disease Virus 3ABC Antibody Test Kit (ELISA), 3ABC Ab 【包装规格】 96×2测试/盒 【预期用途】 本试剂盒用于定性测定猪血清中O型口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC-IgG抗体。用于区别临床野毒感染产生的抗体和用灭活疫苗免疫产生的抗体。 【检验原理】 本试剂盒应用固相酶联免疫吸附试验（ELISA）原理，由包被有高纯度的重组猪口蹄疫3ABC抗原的微孔反应板、辣根过氧化物酶标记的抗猪IgG及其它试剂配套组成。其反应机理为包被抗原与样本中的3ABC-IgG结合，再与酶标抗猪IgG抗体形成“包被抗原+3ABC-IgG+酶标抗猪IgG抗体”复合物，加入显色剂，通过酶催化反应显色。显色深浅与3ABC-IgG的量成正比，当显色超过设定的临界值时结果判为阳性，表明免疫有效或有自然感染。 【主要组成成份】 1． 3ABC抗原包被板 96T×2块 包被有重组3ABC抗原 2． 酶标记物（黄盖） 22ml×1瓶 含辣根过氧化物酶标记的抗猪IgG抗体 3． 样本稀释液（透明盖） 25ml×1瓶 主要成份为0.01M PBS缓冲液 4． 浓缩洗涤液(20×)（白盖） 50ml×1瓶 PBST缓冲液，用前用去离子水20倍稀释 5． 3ABC-IgG阴性对照血清（绿盖） 1.5ml×1瓶 主要成份为3ABC-IgG阴性血清 6． 3ABC-IgG阳性对照血清（红盖） 1.5ml×1瓶 主要成份为3ABC-IgG阳性血清 7． 显色剂A（紫盖） 12ml×1瓶 主要成份为过氧化脲 8． 显色剂B（黄盖） 12ml×1瓶 主要成份为TMB 9． 终止液（蓝盖） 12ml×1瓶 主要成份为H2SO4 10． 盖板膜 6张 11． 说明书 1份 不同批号的试剂组份不可混用。 【储存条件及有效期】 于2℃～8℃避光保存，防止冷冻，有效期6个月。 【适用仪器】 1．酶标仪，单波长450nm测量或双波长450/630nm测量。 2．ELISA用洗板机。 3．微量移液器。 4．水浴箱或恒温箱。 5．微量振荡器。 【样本要求】 1．本试剂检测的样本为猪血清，样本应无菌采集，2℃～8℃贮存不超过一周，长期应在 2．避免使用严重溶血、有沉淀物、含悬浮纤维蛋白及污染长菌的样本。 3．样本中含有常规用量的EDTA、枸橼酸钠或肝素钠等抗凝剂不影响本实验。 【检验方法】 1．加样：根据样本数量，取所需板条。单波长检测时，需设空白对照1孔（不加任何液体）；双波长检测时，不设空白对照孔。设阴、阳性对照各2孔，分别加入不稀释的阴、阳性对照血清100μl于相应孔中。其余为样本孔，每孔加100μl样本稀释液，再分别加入样本10μl（加入样本后颜色会有变化）。 2．温育：加好样后振荡10秒，充分混匀，置37℃温育30 3．洗板：甩去孔内液体，用洗涤液（浓缩洗涤液用去离子水以20倍稀释）注满反应板孔，洗涤5次，每次停留1分钟，最后一次洗后拍干。 4．加酶：每孔加酶标记物100μl，注意：空白孔不加酶标记物，也不加其他任何液体。 5．温育：置37℃温育30 6．洗板：同上洗涤。 7．显色：每孔加显色剂A、B各50μl，振荡混匀，37℃避光反应15分钟 8．终止：每孔加终止液50μl，振荡10秒，充分混匀。终止后5～30分钟内读数。 9．读数：单波长检测时，酶标仪检测波长为450nm，以空白孔调零，读取各孔吸光度值（A值）；双波长检测时，以450nm为主波长、630nm为参比波长，读取各孔吸光度值（A值）。注意：单波长检测时，若酶标仪读数前没有以空白孔调零，则所得的结果均应减去空白孔A值再做计算和判定。 10．结果判定： 临界值（CO.）= 0.15。 样本A值（S）/临界值（CO.）≥1，判定为3ABC-IgG阳性； S/CO.＜1，判定为3ABC-IgG阴性。 阴性对照血清A值应小于0.10，阳性对照血清A值应大于0.70，否则试验不成立，需重新试验。注意：单波长检测时，若酶标仪读数前没有以空白孔调零，则阴阳性对照血清A值均应减去空白孔A值再做判定。 【参考值（参考范围）】 未自然感染猪口蹄疫病毒的健康猪群为阴性，S/CO.＜1。 【检验结果的解释】 1．严重溶血、血清中纤维蛋白分离不充分、含红血球、有沉淀物、长菌的样本可能导致假阳性。 2．因个体差异或免疫时间长短等因素可能会出现个别猪只免疫疫苗后检测