医学特种检验与实验室诊断 孙龙安主编.pdf

第一节　　标记免疫分析方法学 的进展 自从 年 和 创 建 放 不同物质标记配体的方法，国外统称为配体分 射免疫分析 以来 ，至今 已有 多年 的历 史 ， 析法 。在 国 内我们提 出以标记免疫分析这名 在这 多年 的发展 过程 中 已 由放 射 免疫 分 称更为确切，由此被 国内学者们所采用。 析 （简称放免）衍生出多种非放射性同位素标 一、放射免疫分析（ 记的免疫分析技术 （表 。第一种是 以酶 标记 的免疫分析技术称为酶标免疫分析 （简 （一 ）竞 争 性 ，又称传统 称酶免），第二种是从发光物质标记的免疫分 析称发光免疫分析（简称光免 ），第三种是受体 （二 ）非 竞 争 性 ，又 称 免 疫 放 射量 度 分析技术，第四种是核酸分析技术等。这些 以 分 析（ 表 标记免疫 分析大事记 与 的区别见表 表 与 的区别 二、酶标记免疫分析（ 酶标免疫 分析 是 世 纪 年代发展起 来 的一种 以测定酶活性来确定被测物质量 的 免疫分析方法 。最早仅是用酶标记来代 替放 射 性 同位 素标 记 抗 原 ，所 以，基 本 原 理 与 一 样 ： 因上述反应需彻底除去游离酶部分 ，就 必须应用分离试剂 。但在 中所有 分离试剂都不适用于 ，所 以 ，包 被 材 料 和 技术 ，即固相分离方法应运而生 。为此 应用 固相配体 已属必不可少 。 方 法 视 分 离和 不 需分 离 游 离 物 而 分 为 非均 相 和均相 ，但 前者 的灵敏度 高 ，测量浓度 范 围宽而 被 广泛 应用 。非均 相 分竞 争法 和非竞争法两种： （一 ）竞 争法（图 （二 ）非竞争法（图 近 年 来 由于 链 霉 素 生 物 素 系 统 的应 图 非竞 争法 非均相 用 ，使非均 相 又得 到 了进一步发展 （图 。 图 的链霉 素 生物素系统 生物素 亲和素系统具有如下特点。 生物素分子小结构简单，极易与抗体 以共价键结合 ，而且稳定，同时对结合物 的原 始生物活性无不 良影响 。 亲和素对生物素的亲和力极高，亲和 常数为 ，是抗 原抗 体反应 的百万 倍 ，具有高灵敏和特异性。 亲和素性质极为稳定，每分子可结合 个生物衍生物，可作为生物素的桥接物 ，起 图 的亲和 素系 统 放大作用 。同时 ，它又是 酶 蛋 白，可 直接 与各 种生物分子偶联 。 立 即 以光子形式释放 出能量 ，反应速度快是 均相 ，是指反应 自始至终处于均一 其优点，但发光持续时间短，又是它明显的缺 的液相 中，不需分离步骤 。由于生物素 亲 点，同时还存在信号强度弱、易受干扰、本底 和素系统的应用 ，使均相 也 得 到 了 发 高、操作烦琐等 问题，使化学发光免疫分析一 展。在此反应中，生物素 亲和素是作为酶 时 难 以推 广 应 用 。近 年来