高效液相色谱圆二色检测技术在手性化合物分析中的应用-Eduwest.PDF

第 34卷 分析化学 ( FENX I HUAXU E) 　评述与进展 第 3期 　　　　　　 　　　　　 　　　　　　　　　 　　 2006年 3月 Ch inese Jou rnal of A nalytical Chem istry 427～432 高效液相色谱圆二色检测技术在手性化合物分析中的应用 田　芹 　毕承路 　任丽萍 　汪丽萍 　周志强 (中国农业大学理学院应用化学系 ,北京 100094) 摘 　要 　对近年来高效液相色谱圆二色检测技术在手性化合物分析中的应用进展进行综述 ,简单介绍了高 效液相色谱圆二色检测器的原理和特点 ,着重介绍了非手性色谱条件下圆二色检测技术在手性化合物对映 体纯度测定 、复杂基质中手性化合物分析以及在手性化合物绝对构型测定中的应用 ,并讨论了它的应用前景 。 关键词 　高效液相色谱 ,圆二色检测器 , 手性 , 综述 1　引　　言 手性是自然界的本质属性之一 ,是大分子和分子水平呈现多种现象的源泉 。在生物化学和药物化 学行为中 ,手性药物异构体之间存在着明显的代谢和药理作用的差别 ,因此对映异构体的分析对分子立 体化学和生物毒性的研究具有重要意义 。多年来国内外学者建立了许多分离纯化手性物质的方法 ,其 中最常见的方法是借助于手性固定相 、手性试剂或手性流动相来达到分离分析的目的 ,这些方法因手性 固定相 、手性试剂和手性流动相的种类和数量受到很大的限制 ,并且分析的条件 、分析步骤 、外来干扰等 对实验的结果会产生很大影响 , 因此产生了可 以用普通分析手段检测手性化合物的手性光学方法 ( ) ( ) Ch iraop tical m ethod ,实现该方法的手性检测器有旋光检测器 Po larim etric detector 、旋光色散检测器 ( ) ( ) [ 1 ] Op tical rotation disp ersion detector ORD 和圆二色检测器 C ircu lar dichro ism detector CD 。旋光检测 器和旋光色散检测器是利用左 、右圆偏振光在被测物介质中折射率不同的基础上建立起来的[ 2 ] ,检测 ( 受温度和溶剂的变化影响大 ,很难做到梯度洗脱 ,但是对旋光活性化合物而言 ,是通用型检测器 不需 ) 生色团 ;而圆二色检测器是在对左 、右圆偏振光吸收能力不同的基础上建立起来的 ,克服了旋光检测 器和旋光色散检测器的缺点 , 比它们有更高的灵敏度和选择性 [ 3 ] ,近些年得到了学者的关注 。1980 年 , D rake等 [ 4 ] 首次使用圆二色检测器 ,在液相色谱上实现了手性化合物的分离及纯度的测定 ,从此高效液 相色谱圆二色检测技术在手性化合物分析上得到不断发展 ,现已成为手性化合物分析的有力工具[ 5, 6 ] 。 本文从高效液相色谱圆二色检测技术的原理和特点入手 ,分析讨论了其应用进展 ,并展望了其应用前景 。 2　圆二色检测的检测原理及特点 当一束平面偏振光通过光学活性物质时 , 由于左右圆偏振光的折射率不同 ,偏振面将旋转一定的角 ( ) 度 ,这种现象称为旋光 Op tical rotation ,偏振面旋转的角度称为旋光度 。若光学活性物质含有生色团 对左 、右圆偏振光的吸收能力也不同 ,则造成通过的左 、右圆偏振光不仅速度不同 ,而且振幅也不一样 。 因此 ,叠加产生的偏振光将不再是平面偏振光 ,而是椭圆偏振光 ,这种现象称为圆二色性 。圆二色检测 器的响应信号与旋光物质对左 、右圆偏振光的吸收差成正比, 圆二色性与波长有关