高效液相色谱法检测兔血浆和脑脊液中的美罗培南浓度.pdfVIP

和脑脊液，加入美罗培南标准液，制备标准曲线，血清中美罗培南的浓度测定线 范围为O．1—100mg／L，R为0．9996。 2、样品的处理和测定 血清和脑脊液样品的处理方法相同，分别精密吸取0．5ml、0．2ml样品于试管 中，离心后取上清液20“l进样，以标准曲线计算美罗培南浓度。 五、统计学处理 计算各时间点血清和脑脊液美罗培南浓度，数据以均数士标准差(娃S)表示。 通过计算脑脊液与血液的比值比，比较实验组和对照组在给药后相同的时间点上 美罗培南的脑脊液穿透率的差异。 幺士 申 耋口7I写 血清的峰值时间在30分钟，脑脊液的峰值时间在4小时，并在在第4小时时 间点上达到脑脊液的最大穿透率。其中对照组脑脊液最大穿透率l1．91‰5．36％； 实验组则为12．07‰12．70％。在使用美罗培南l小时以后，脑脊液中可测得其浓 度，在对应的时间点上，实验组的穿透率高于对照组。。 讨论 Brain 血脑屏障(Blood Nervous System，CNS)内环境稳定的结构基础，其结构的完整或改变对神经系统 的生理病理研究有着重要意义。血脑屏障位于血液与CNS的神经组织之间，限制某 些物质进入脑组织，是由CNS无窗孔毛细血管内皮细胞及细胞间紧密连接、基膜、 周细胞、星形胶质细胞脚板和极狭小的细胞外隙共同组成的一个细胞复合体。其 功能、形态学的主要基础是覆盖在CNS毛细血管腔面的脑内皮细胞，具有高度选 择性，能防止毒素及其他有害物质进入脑实质内。在多种原因造成的脑损害时， 常最先表现为血脑屏障的开放。血脑屏障是中枢神经系统与外周血循环之间物质 交换的调节器，由脑毛细血管内皮细胞、基膜和神经胶质膜构成的，其中内皮细 胞是构成血脑屏障的主要结构。脑的毛细血管内皮细胞底面是一薄而连续的基膜， 4 底面和基膜之间仅有一狭小的间隙。基膜带有一定的负电荷，由微纤维形成网状 骨架。脑毛细血管周围具有一层紧密包绕的神经胶质鞘，由星形胶质细胞突起组 成，突起之间有不连续的裂隙。血脑屏障可阻止多种物质进入脑，它对于非必需 的或有害的循环成分来说是一道屏障，但营养物质和代谢产物可顺利通过，以维 持神经系统内环境的相对稳定。其它非神经组织中毛细血管壁上的内皮细胞之间 存在大量直径约为50rim的跨细胞孔或裂隙，水、电解质以及部分大分子物质可 自由通过。与之不同的是脑毛细血管内皮细胞间存在着紧密连接，有效孔径仅为 m，血液中的物质不能从细胞连接的空隙中通过。脑内皮细胞 (1．4～1．8)x10d1 只有少量内吞泡，内吞活性很低，进一步限制了物质跨细胞的转运。由于血脑屏 障的这些独特结构，使得大脑在吸收外界物质时十分地严谨和挑剔，不仅对所吸 收分子的大小有限制，而且对它们所负的电荷和溶解性有要求。这就避免了大脑 受到血液循环中有害物质如毒素和病毒的侵害。但是这层屏障同时也阻碍了许多 有潜在价值的药物进入大脑。一般来讲，只有那些亲脂性的分子量小于500D的 小分子才能顺利通过血脑屏障。 蛛网膜下腔出血(SAH)主要的病理生理改变可能与血脑屏障(BBB)的破 坏和脑水肿的形成有关，有学者认为引起上述病理改变可能与SAH后血管内皮细 胞凋亡有关。SAH后，早期即出现平滑肌剧烈收缩，内弹力膜及内皮细胞随之皱 缩致血管腔狭窄，内皮细胞在早中期只发生轻度肿胀或变性，晚期血管舒张恢复 可出现内皮脱落，内弹力膜断裂和分布不均匀以及平滑肌细胞部分退性变。另外， SAH当时和SAH后早期颅内压升高引起组织供血供氧不足也可能是BBB开放的 原因，蛛网膜下腔的血液中的某些成分和分解产物直接作用于脑微血管或启动自 由基反应、脂质过氧化反应炎症反应以及凋亡级联反应，使脑微血管通透性增加， 从而引起BBB损伤。Gemano等研究报道，血脑屏障的通透性在蛛网膜下腔出血 36h开始增加，48h达到高峰，72h恢复正常。本实验的目的是通过测量脑脊液中 美罗培南浓度间接反映血脑屏障在蛛网膜下腔出血后的改变。实验中家兔的蛛网 膜下腔出血模型的建立采用二次注血法，在完成第二次注血后静脉应用美罗培南， 于血脑屏障的开放期内采集脑脊液样本，样本测量结果证实，蛛网膜下腔出血后 家兔的脑脊液中美罗培南的药物浓度要