鲍曼不动杆菌铁蛋白的抗氧化功能研究.PDFVIP

微生物学通报 Dec. 20, 2014, 41(12): 2474−2480 Microbiology China © 2014 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.140465 研究报告 鲍曼不动杆菌铁蛋白的抗氧化功能研究 1,2 2 2* 2 1 谭潇 李冉辉 游晓星 蒋传好 黄泽智 (1. 邵阳医学高等专科学校 湖南 邵阳 422000) (2. 南华大学 病原微生物研究所 特殊病原体防控湖南省重点实验室 湖南 衡阳 421001) 摘 要：【目的】克隆鲍曼不动杆菌铁蛋白(Abferritin)基因，并研究其抗氧化功能。【方法】 荧光定量PCR 检测氧化应激下Abferritin 基因的表达量，并将其基因克隆到表达载体pET28a 以构建重组质粒 pET28a-Abferritin ，转化大肠杆菌 BL21(DE3) 得到重组菌 BL/pET28a- Abferritin ，IPTG 诱导目的蛋白表达并利用镍柱亲和层析纯化该蛋白。比色法测定 Abferritin 蛋白的 Fe2+氧化酶活性，自由基清除实验测定其抗氧化功能。菌落计数法观察重组大肠杆菌 在H2O2 应激条件下的存活率。【结果】Abferritin 基因在氧化应激下表达增高。重组质粒在大 肠杆菌 BL21(DE3) 中高效表达，通过Ni2+ 亲和层析纯化获得了 Abferritin 蛋白。该蛋白具有 2+ Fe 氧化酶活性，能有效减少氧自由基的形成及提高大肠杆菌抵抗氧化应激的能力。【结论】 氧化应激能诱导Abferritin 基因表达上调，且该蛋白具有亚铁氧化酶活性和抗氧化功能。 关键词：鲍曼不动杆菌，铁蛋白，抗氧化活性 The anti-oxidative activity of Acinetobacter baumannii ferritin protein TAN Xiao1,2 LI Ran-Hui2 YOU Xiao-Xing2* JIANG Chuan-Hao2 HUANG Ze-Zhi 1 (1. Shaoyang Medical College, Shaoyang, Hunan 422000, China) (2. Hunan Provincial Key Laboratory for Special Pathogens Prevention and Control, Insititution of Pathogenic Biology , University of South China, Hengyang, Hunan 421001, China) Abstract: [Objective] This study aimed to clone the ferritin gene Abferritin from Acinetobacter baumannii and identify its anti-oxidative activity. [Methods] Relative expression of Abferritin under oxidative stress was analyzed by real-time PCR. The gene