基于nSSR和cpSSR标记的台湾杉遗传多样性研究分析-林学专业论文.docxVIP

华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 如需保密，解密时间 是否保密 秀 独创性声明 本人声唆所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得豹研究成果．尽 我所知，除了文孛特别加以标注和致谢的地方夕k，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的 研究成果，也不包含荛获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，指 导教师对此进行了审定。与我一弱工作的同志对本研究所做约任何贡献均己在论文中敛了爨 确的说赡，并表示了谢意。 研究应签名： 苍三≥{易 时间：如?中年6月7 7譬 学位论文使用授权书 本入完全了解“华中农业大学关予保存、使用学位论文的规定”，印学生必须按照学校 要求提交学位论文的窜剧本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版和电子叛，并提供 目录检索和阕览段务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。本人淘 意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表，传播学位论文的全部或部分内容。 注：保密学位论文在解密后运用于本授权书。 戮嫦粼：枷伴锄鲐陆牟L 签名西期：汹f争年6月}_7蟊 签名露朝：wf 9年5月f?日 基于nSSR和cpSSR标记的台湾杉遗传多样性研究目 基于nSSR和cpSSR标记的台湾杉遗传多样性研究 目 录 摘 要 I Abstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．][】[ 1前言 ．1 1．1生物多样性危机 l 1．2遗传多样性的含义及研究方法 2 1．2．1遗传多样性的含义 一2 1．2．2遗传多样性的研究方法 一2 1．3本研究所用的分子标记 3 1．3．1分子标记技术在植物遗传多样性研究中的应用 ．．3 l-3．2 SSR标记技术 3 1．3．3 cpSSR标记技术 4 1．4台湾杉的生物学特性及研究背景 4 1．4．1台湾杉的生物学特性 ．．．． 一4 1．4．2台湾杉的生存现状 ．．5 1．4．3台湾杉的研究现状 一7 1．5本研究的目的与意义 7 2材料与方法 ．．8 2．1台湾杉居群遗传多样性的nSSR分析 ．8 2．1．1实验材料 一8 2．1．2实验方法 ．．8 2．2台湾杉居群遗传多样性的cpSSR分析 ll 2．2．1实验材料 ll 2．2．2实验方法 ll 3结果与分析 15 3．1台湾杉居群遗传多样性的nSSR分析 15 3．1．1 DNA浓度检测和质量检测 15 3．1．2 nSSR引物的开发 16 3．1．3 nSSR引物的筛选 16 3．1．4引物退火温度的筛选 17， 3．1．5 PCR扩增产物的检测 ．17 3．1．6台湾杉的遗传多样性分析 18 3．1．7台湾杉居群遗传结构分析 20 3．1．8台湾杉居群问的遗传距离和聚类分析 20 华中农业大学2014届硕士研究生学位论文3．2台湾杉居群遗传多样性的cpSSR分析 华中农业大学2014届硕士研究生学位论文 3．2台湾杉居群遗传多样性的cpSSR分析 ．2l 3．2．1 DNA浓度检测和质量检测 2l 3．2．2 cpSSR引物的开发 ．22 3．2．3 cpSSR引物的筛选 ．22 3．2．4引物退火温度的筛选 23 3．2．5 PCR扩增产物的检测 ． 23 3．2．6 cpDNA的遗传多样性分析 23 3．2．7台湾杉居群遗传结构分析 26 3．2．8台湾杉居群间的遗传距离和聚类分析 26 4讨{仑 ．．28 4．1引物的通用性分析 ．．28 4．2台湾杉的遗传多样性 ．．28 4．3台湾杉的遗传结构 ．．30 4．4保护策略 ．．3 l 参考文献 32 附录 39 致谢 ．．53 攻读学位期间发表的文章 54 基于nSSR和cpSSR标记的台湾杉遗传多样性研究基于nSSR和cpSSR标记的台湾杉遗传多样性研究 基于nSSR和cpSSR标记的台湾杉遗传多样性研究 基于nSSR和cpSSR标记的台湾杉遗传多样性研究 摘 要 台湾杉(Taiwania cryptomerioides)又名秃杉，杉科(Taxodiaceae)台湾杉属 (Taiwania Hayata)，是第三纪古热带植物区系孑遗植物，为国家一级保护树种。本文 以野生台湾杉居群为研究对象，采用核基因组分子标记nSSR和质基因组分子标记 cpSSR相结合的方法，综合运用种群生态学和现代遗传学的原理及方法，在居群水 平上探讨台湾杉的遗传多样性水平、遗传结构、基因流和居群进化历史等，充分了 解台湾杉的保护现状，阐明台湾杉濒危的遗传学机制和原因