HLA-B27检测及其临床应用.ppt

* * Reiter综合征 主要症状发生次序为尿道炎、结膜炎和关节炎。 * * * * * 各方法敏感性 * 此法最为传统和常用 * TMB 四甲基联苯胺 * * * HLA-B27检测及其临床应用 徐美胜 2016年11月24日 * HLA-B27及其临床应用 HLA-B27疾病相关 血清阴性脊柱关节病类型及特点 强直性脊柱炎特点及其与B27关联机制 HLA-B27 检测方法 MLCT、ELISA、IMS-ELISA、FCM、PCR-SSP * HLA-B27相关疾病 * 疾病 HLA-B27阳性率(%) 强直性脊椎炎 90 银屑病性关节炎 ? 55 Reiter’s综合症 37 反应性关节炎 沙门氏菌感染 29.7 志贺氏菌感染 20.7 耶尔森氏菌感染 17.6 淋病双球菌感染 14.0 正常人群 ? 2～7 血清阴性脊柱关节病（脊柱关节炎） 这是一组慢性炎症性风湿性疾病，具有特定的病理生理、临床、放射学和遗传特征，炎性腰背痛伴或不伴外周关节炎，加之一定特征的关节外表现是这类疾病特有的症状和体征。这一类疾病包括：强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis，AS)，反应性关节炎(reactive arthritis，ReA)，银屑病关节炎(psoriatic arthritis，PsA)，炎症性肠病性关节炎(arthropathy of inflammatory bowel disease，IBD)，未分化脊柱关节炎和幼年慢性关节炎。几种脊柱关节炎病情逐渐进展，都可能发展成典型的强直性脊柱炎 * 血清阴性脊柱关节病共同特点 RF（一） 家族聚集现象 与HLA-B27不同程度相关 皆可影响脊柱，都有不同程度的骶髂关节炎，也可影响外周关节，下肢关节多于上肢关节，且呈不对称性。 与革兰氏阴性杆菌有一定相关性： 强直性脊柱炎与肠道肺炎克雷白杆菌相关 Reiter综合征与沙眼衣原体、福氏痢疾杆菌相关 反应性关节炎与沙门杆菌、痢疾杆菌、耶尔森菌和HP相关 * 血清阴性脊柱关节病共同特点 临床上有很多共同或重叠之处： 眼炎，尿道炎，前列腺炎，口腔、肠道和生殖器溃疡结节性红斑，银屑病样皮疹坏死性脓皮病，血栓性静脉炎 基本病理变化以肌腱端周围和韧带附着于骨的部位为主(附着端炎)而非滑膜，也可发生在眼、主动脉瓣、肺实质和皮肤，而不同于以滑膜病变为主的类风湿性关节炎，而且无类风湿皮下结节。 * HLA-B27相关疾病：强直性脊柱炎 Ankylosing Spondylitis，AS 患病率：0.3%，20-30岁，男女比例 10:1，有家族倾向； 主要侵犯：中轴关节（骶髂关节、脊柱骨突、脊柱旁软组织） 可伴发外周关节及关节外表现，严重者发生脊柱畸形和关节强直 B27检测可作为有相关症状或高危人群AS早期的筛选方法！ AS不是RA的一种特殊类型！ * 强直性脊柱炎 类风湿性关节炎 地区分布 种族差异大 世界性 性别分布 男＞女 女＞男 年龄 20-30 30-50 家族史 明显 不明显 类风湿因子 （－） （?） HLA-B27阴性的AS 约5-10%的AS患者为HLA-B27阴性 AS患者的HLA-B27阳性率达90-95% 我国汉族人群HLA-B27阳性率2-7%（3千万-1亿），AS患病率为0.3%（＞4百万），大部分HLA-B27阳性者并不发生AS。 HLA-B27与AS * HLA-B27与AS * 健康人群HLA-B27阳性率及AS患病率各地区、种族有显著的差异 HLA—B27与强直性脊柱炎的发病有很强的相关性 两种错误认识：HLA-B27阳性≠AS！ HLA-B27阳性不会转阴！ HLA-B27阳性率 AS患病率 AS患者B27阳性率 中国人 2-7% 0.3% 90～95% 欧洲白种人 4～13％ 1％ 80～100% 南非黑人 1％ 很低 22% 美国黑人 2～4％ 57% 印地安人 9～50％ 6～12％ 80～100% HLA-B27检测方法及评价 抗原水平 微量细胞毒法 ELISA IMS-ELISA 流式细胞术法 基因水平 PCR-SSP * 微量细胞毒法（microlymphocytotoxic test，MLCT） 原理：如果受试者淋巴细胞表面表达有相应的HLA-B27抗原，就可以与B27抗体结合，形成Ag-Ab复合物激活补体，发生对细胞膜的破坏及细胞杀伤作用，通过染色法观察，死细胞的细胞膜通透性改变，染料能够进入使之着色，而活细胞细胞膜完整不被染色。根据死细胞占全部细胞的百分比，可以判断受试者淋巴细胞表面是否存在HLA-B27抗原及其与抗体的反应强度。 优点：不需特殊仪器设备，易于操作，一般的实验室都可开展。 缺点：标