细胞周期调控.ppt

细胞周期与周期调控 第一节 细胞周期(cell cycle) 一、定义： 连续分裂细胞从上一次分裂结束到下一次分裂完 成所经历的全过程。 细胞增殖周期 细胞周期时间(Tc)： TG1+TS + TG2 + TM 大约12~32h 二、细胞周期各时相及主要事件 3、G2期 (DNA合成后期) 染色体凝集相关蛋白，微管蛋白 成熟促进因子、RNA、蛋白质的合成，为M期作准备。 0.3％DNA 复制完成 细胞内DNA含量由2n增至4n 一、 细胞周期调控系统的组成 细胞周期调控系统的蛋白质 细胞周期检查点（checkpoint） 4.促进Cdk调节因子降解的酶复合物 SCF和APC介导Cdk调节蛋白的降解途径是：泛素化 SCF的活性在细胞周期中是不变的，可识别被磷酸化的CDKI上某个特定的氨基酸序列。 APC的活性启动是由于其复合物中加入了活化亚基cdc20，APC催化泛素连接到Cyclin破坏框附近的赖氨酸上。 第四节 细胞周期事件的胞内调控机制 1. G1期中cyclin-Cdk复合物的作用 2. S期中cyclin-Cdk复合物的作用 3. M期中cyclin-Cdk复合物的作用 细胞周期的胞外调控因素 单细胞生物 营养 多细胞生物 生长因子信号 信号通路： ras途径，cAMP途径、磷脂酰肌醇途径。 如通过ras途径，激活MAPK，MAPK进入细胞核内， 激活c-myc，进而促进cyclin D、SCF、E2F等G1-S有关的基因表达，细胞进入G1期。 生长因子的调节 血小板衍生生长因子(PDGF) 表皮生长因子(EGF) 成纤维细胞生长因子 转化生长因子(TGF) 促红细胞生成素 胰岛素样生长因子 生长因子无种属特异性，而有组织特异性 不同种类的细胞具有不同的生长因子受体 多种生长因子共同调节细胞增殖 (3)M期的退出 CyclinB的降解、Cyclin与Cdk分离； Cdk1的第14 Thr ，15 Tyr二个位点的氨 基酸残基磷酸化； 使MPF失活，促进细胞从M期向G1期转化 生长因子主要作用 生长因子主要作用G1期和S期 思考题： 1.细胞周期的概念 2.泛素的概念 3.细胞周期各时相生物化学变化 4.细胞周期调控因素 5.MPF的活化及作用 细胞周期中，细胞生化和形态结构等方面的变化，以及相邻时相间的转换，均是在细胞本身和环境因素的严格控制下有序进行的。 细胞周期中各主要事件是在多种蛋白构成的复杂网络控制着的，G1期到S期、G2期到M期是细胞周期调控的两个关键时期，不同的蛋白质作用于这些调控点后，实现其对细胞周期的多因子、多层次调控。 CDK激酶是细胞周期运转的引擎分子，对细胞周期起着核心性调控作用。 不同种类的cyclin与不同种类的CDK结合，构成不同的CDK激酶，不同的CDK激酶在细胞周期的不同时期表现活性，对细胞周期的不同时相进行调节。 MPF被发现后，不少学者进行MPF的纯化工作，由于其在细胞中稳定性较差，进展缓慢。 1988年Maller实验室, Lohka等人以非洲爪蟾卵为材料分离纯化获微克级MPF,并证明含有P32和P45,两种蛋白。 MPF是由两种蛋白质亚基组成的异二聚体。 Metabolism：新陈代谢；organelles duplicate:细胞器复制；cytokinesis：胞质分裂 G1期又称为DNA合成前期，处于S期与上次分裂期之间，S期DNA复制所需的多种酶与蛋白质即在该期合成。 G2期，又称为DNA合成后期，是S期与下次分裂期之间的一个时期，该期发生的变化可为S期向M期的转变提供条件。 S期就是DNA合成的时期。 在S期及M期还存在一段被称为破坏框的特殊序列，由9个氨基酸残基构成，位于蛋白质分子的近N端，可在中期以后的cyclinA、B的快速降解中发挥作用。 cyclinA、B通常是通过多聚泛素化途径被降解的。 泛素是一种由76个氨基酸组成的高度保守的蛋白质，其C端可与非特异性泛素活化酶E1的半胱氨酸残基结合，泛素被活化。E1泛素复合体可将泛素转移到泛素结合酶E2的胱氨酸残基上，在一种特异性的泛素连接酶E3（又称后期促进复合物APC）催化下，泛素连接于cyclinA、B分子破坏框附近的赖氨酸残基上，其他的泛素分子随后相继与前一个泛素分子相连，形成一条多聚泛素链，此链可作为一个标记物被蛋白酶体所识别，进而被其降解。 不同的cdk分子结构中，均存在一段相似的激酶结构域，其中有一小段序列保守性高，是介导激酶与周期蛋白结合的区域。 不同的CDK通过结合特定的周期蛋白，使相应的蛋白质磷酸化，引发或控制细胞周期的一些主要事件。 细