科技兴检奖项目公示表-西北农林科技大学食品学院.DOCVIP

项目公示表 项目名称 轻纺领域中多种致病菌的危害识别及其控制关键技术的研究 推荐单位 陕西出入境检验检疫局 项目简介 沙门氏菌和金黄色葡萄球菌是常见的食源性致病菌，对人体健康危害大，可引起人类食物中毒、胃肠炎、人类的伤寒及副伤寒等肠道疾病，严重者可导致死亡，是各国公认、全球报道最多、世界最常见引发食源性疾病暴发的两种首要病原菌，也是我国食源性疾病的主要病原体。 该项目在国家自然科学基金、国家质检总局科技项目、中国博士后科学基金等5个项目的资助下，历经8年时间，由多部门联合攻关，对抗生素使用导致沙门氏菌耐药性、金黄色葡萄球菌中肠毒素和生物被膜的危害识别和控制进行了研究，取得如下创新成果： 1、首次阐明我国食源性产肠毒素A和MRSA金葡菌菌株的流行病学特征和规律。 阐明了产肠毒素A的金葡菌，其优势分子型为 ST1、ST5 和ST6，而食物中毒的优势分子型为高表达肠毒素 A的ST6-t701菌株系。同时也阐明了中国动物源性食物中 MRSA 污染较少，但是优势分子型为 ST9 型 MRSA 菌株，与食源性动物优势菌株一致，而非欧美优势 ST398 型 MRSA 菌株，食物中污染较少的ST398 型主要为 MSSA菌株，实现了对食源性产肠毒素A和MRSA的金葡菌菌株分子型的精准识别，减少产肠毒素A和“超耐药”菌株的进入到食物链中。 2、破解了我国金葡菌引起食物中毒之谜。 通过调查主要食物中金黄色葡萄球菌污染情况及其分子特性，结合食物中毒爆发事件菌株，发现高产肠毒素 A 是食源性爆发金葡菌的关键毒力因子，肠毒素A 的表达水平与食物中毒的严重程度呈正相关，可显著增强食源性爆发金葡菌的致病作用，进一步揭示了食源性金葡菌的致病机制。另外，使用多位点序列分型(MLST)方法分型，明确了中国金葡菌食物中毒爆发的优势菌株的分子型为 ST6型，全基因组揭示 ST6 型金葡菌可能携带一种全新的肠毒素基因，与肠毒素 A、E 和 P 的基因序列存在较高的基因同源性，是ST6 型金葡菌容易引起食物中毒的另外一个潜在的重要原因。 3、揭示了沙门氏菌耐药机制的影响因素及其相互关系。 研究 MMR 系统突变/缺失沙门氏菌超级突变子耐药表型、基因型和突变频率及其关系，MMR 系统突变/缺失对沙门氏菌其它耐药机制的影响及作用，MMR 系统突变/缺失对耐药基因水平传播与转移的影响，基因突变/缺失 MMR系统中 mutS 蛋白对错配 DNA 的识别活性，揭示 MMR 系统突变/缺失介导的沙门氏菌耐药性产生机制。研究结果将为进一步丰富沙门氏菌耐药机制、预防耐药株出现和传播提供理论依据，保障食品和公共卫生安全。 4、明确了环境条件对感应信号分子AIPs和AI-2的影响及其对肠毒素A和生物 膜的影响。 通过建立四种感应信号分子AIPs的 LC-MS/MS 检测方法进行AIPs分子分型检测，明确了 AIPs 分子的分子型不随时间和培养的变化而变化，而与菌株相关，其只表达 1 种 AIPs 分子，其中 AIP-IV 分子在实际菌株中没有检出；但随着时间的增加，AIPs 分子产量逐渐减少；AIPs 分子与 SEA 和生物膜的产量变化趋势相同，即同增同减；但是在添加 AIPs 分子的试验中，发现 AIPs 分子对生物膜的形成影响较大，而对肠毒素 A 的产生影响较小。 通过哈氏弧菌 BB170 菌株法进行 AI-2 分子表达量的检测，发现 AI-2 分子产生受环境影响变化无规律，AI-2 分子对 SEA 和生物膜的影响较小，在添加 AI-2分子同样也发现 AI-2 分子对 SEA 和生物膜的影响较小，说明 AI-2 分子对 SEA和生物膜的影响较小 5、创建了新的检测技术体系。 建立了定性和定量分析 4 种 AIPs 分子的 LC-MS/MS 检测方法，并将该技术成功应用于检测不同培养环境条件对群体感应信号分子 AIPs 影响，为科学准确的检测 AIPs 分子的变化对肠毒素 A 和生物膜等的研究提供了重要技术支持，该方法已应用于实践，成为理想抗菌添加剂的剂靶标检测提供技术支持，快速筛选抑制AIPs信号分子的新型抗菌添加剂。采用热裂解气相色谱法对羽绒及其制品中沙门氏菌进行脂肪酸分析，提出了将顺式-10-十九烯酸脂肪酸作为沙门氏菌鉴定的特征性脂肪酸，该方法已应用于实践，指导轻工及纺织生产企业监控生产过程中的沙门氏菌。通过10%的兔血浆包被96孔，得到重复性较好的定量检测金葡菌形成生物膜的方法，该方法应用于食品生产环境中金葡菌生物膜形成能力的检测，指导食品企业监控生产过程过程中的金葡菌形成生物膜能力强的菌，减少金葡菌的污染。近3年在陕西省相关企业应用，取得重大经济和社会效益。 本成果发表论文63篇（SCI 34篇，其中SCI一区收录14篇），出版著作3部，行业标准1项，获国家发明专利2项，培养