几种不同提取方法对小麦叶片总蛋白双向电泳的影响-麦类作物学报.PDF

麦类作物学报 　2009 ,29 (6) : J ournal of Triticeae Crop s 几种不同提取方法对小麦叶片总蛋白双向电泳的影响 金 艳 ,许海霞 ,徐圆圆 , 尚晓丽 ,崔党群 (河南农业大学农学院 ,河南郑州 450002) 摘 　要 : 为探索小麦叶片蛋白质提取的最优方法 , 以普通小麦品种石 4 185 的叶片为材料 ,研究了三氯乙酸/ 丙 酮法 、裂解液法 、尿素/ 硫脲法 、KCl醋酸铵甲醇法等四种不同蛋白质提取方法对小麦叶片蛋白双向电泳图谱的影 响 。结果表明 ,三氯乙酸/ 丙酮法获得的蛋白点形状规则 、清晰 ,且重复性好 ;裂解液法拖尾现象较轻 ,但蛋白点数 少且欠清晰 ,重复性也不如前者 ;尿素/ 硫脲法的蛋白点数很少 ,也较为弥散 ,且有明显的拖尾现象 ; KCl醋酸铵甲 醇法使大量蛋白丢失 ,蛋白点数非常少 ,且上部竖纹干扰较重 。因此 ,三氯乙酸/ 丙酮法是提取小麦叶片蛋白的较 优方法 。 关键词 : 小麦 ; 叶片蛋白质 ;提取方法 ;双向电泳图谱 ( ) 中图分类号 :S5 12 . 1 ; S3 12 　　　　文献标识码 : A 　　　　文章编号 :1009104 1 2009 Eff ect of Diff erent Extraction Protein Methods on Twodimensional Electrophoresis of Wheat Leaf Protein J IN Yan , XU Haixia , XU Yuanyuan , SHANG Xiaol i , CUI Dangqun ( College of Agronomy , Henan Agricult ural U niver sit y ,Zhengzhou , Henan 450002 ,China) Abstract : In or der to st udy t he eff ect of diff erent p rot ein ext raction met ho d s on t wodimen sional elect ro ( ) p hore si s 2D E and exp lore an op timal p rot ein ext raction met ho d of w heat leave s , we co mp ared t he eff ect on 2D E of 4 diff erent p rot ein ext raction met ho d s , includin g TCA/ acetone met ho d , ly si sbuffer met ho d , urea/ t hiourea met ho d and KClammonium acet at emet hanol met ho d , u sin g leave s of w heat cultivar Shi 4 185 . The re sult s indicat ed t hat t he op timal met ho d wa s TCA/ acetone met ho d , w hich had st able , clear an d rep eat able p rot ein sp ot s. The second wa s ly si sbuff er met ho d wit h slight t ailing p heno mena , an d lower t he rep eat abilit y and clarit y . The 2D E