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! 微 生 物 学 报 !（）：
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年 月 日
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产单核细胞李斯特菌 $#! 基因在大肠杆菌中
的表达及其单克隆抗体的研制
殷月兰，董 慧，焦新安 ，焦红梅，顾志强
（扬州大学生物科学与技术学院 扬州 ##/$$ ）
摘 要：利用614 技术从血清型%I# 的产单核细胞李斯特菌J+! 株中扩增出!#$ 基因，经克隆筛选和测序鉴定
后，构建成该基因的原核表达载体 及 ，转入 后， 诱导目的蛋白的表达。
KL@M6%*N5 K@3*N5 % O ’( P63L Q(Q
65L@ 结果表明， 基因在两种载体中均获得表达，融合蛋白的大小分别约为 和 。以纯化蛋白为材
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料进行了 单抗的研制，获得 株抗 的单克隆抗体杂交瘤细胞株，腹水单抗 效价为 !
5*N5 ! 5*N5 @JPQ5 %S/ T %$ ’ %S % T
%$/ 。选取单抗%5/ 进行U)VN)-W ,:CN 分析，结果表明单抗%5/ 能和表达产物进行特异性反应，且与J+! 多抗血清的
结果一致。 基因的原核表达及单抗的研制为研究 蛋白的生物学活性及其致病作用奠定了基础。
U)VN)-W ,:CN !#$ 5*N5
关键词：产单核细胞李斯特菌； 基因；表达；单克隆抗体
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中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ）
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产单核细胞李斯特菌（ ，
)(*#+,(! -./#0+.+* ! 材料和方法
J+）是人兽共患李斯特菌病的病原，人感染后能引
发脑膜炎、脑膜脑炎、发热性败血性胃肠炎等临床症 ! ! 材料
状，感染后发病死亡率约为 。 的致病性与 菌株和质粒：产单核细胞李斯特菌血清型
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它的侵袭力密切相关，有多种毒力因子与其侵袭力 菌株 、受体菌大肠杆菌（ ）
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