人TNF-α检测试剂盒ELISA法说明书.PDF

人TNF-α检测试剂盒（ELISA 法）说明书 【产品名称】人TNF-α检测试剂盒（ELISA 法） 【包装规格】96 T/盒 【预期用途】 本试剂盒仅供科研使用，可用于人血清、人血浆、细胞上清液及相关液体样本中TNF-α 的含量测定，不适合用于临床检测。 【TNF-α简介】 1975年，E.A.Carswell等人发现，接种卡介苗的小鼠在注射细菌脂多糖后，血清中出现 一种能使多种肿瘤发生出血性坏死的物质，因此命名为肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor ， TNF) 。1985年Shalaby把巨噬细胞产生的TNF命名为TNF-α。TNF-α的生物学活性占TNF总活 性的70%~95%，是一种单核因子，主要由单核细胞/ 巨噬细胞产生。TNF-α的主要作用有： 1、杀伤或抑制肿瘤细胞；2 、提高中性粒细胞的吞噬能力；3、抗感染；4 、促进髓样白血病 细胞向巨噬细胞分化；5、促进细胞增殖和分化等。 【实验原理】 人 TNF-α 检测试剂盒的原理是双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA ）。预先用抗人 TNF-α 捕获抗体包被微孔板，加样时，标准品或待检样本和检测抗体（生物素标记的抗人 TNF-α 抗体）同时加入微孔板中，人TNF-α 上的2 个抗原决定簇分别与捕获抗体和检测抗 体结合，形成 “捕获抗体-人TNF-α-检测抗体”的免疫复合物而附着在酶标板上，游离的成 分则通过洗涤过程被除去。然后再加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素（SA-HRP ），特 异性结合免疫复合物中的生物素。加入酶底物 TMB，出现蓝色，颜色的深浅与标准品或样 本中人TNF-α 浓度相关。在一定范围内人TNF-α 浓度与OD 值成正比，可通过绘制标准曲 线求出待检样本中人TNF-α 的浓度。 【主要组成成分】 1、试剂盒组分 序号 组分 规格 备注 1 预包被微孔板（人TNF-α抗体） 96 孔 即用型，可拆卸板 2 标准品 （人TNF-α） 2 瓶 冻干粉，按说明书进行稀释 3 ELISA 稀释液 （人TNF-α） 12mL×1 瓶 即用型 4 生物素标记抗体（人TNF-α） 6mL×1 瓶 即用型 5 SA-HRP 12mL×1 瓶 即用型 6 浓缩洗涤液（10×） 30mL×1 瓶 按说明书进行稀释 7 显色液 12mL×1 瓶 即用型 8 终止液 6mL×1 瓶 即用型 9 说明书 1 份 / 10 封板膜 3 张 / 注：不同批号试剂盒中各组分不能互换 地址: 广东省佛山市佛山新城岭南大道南2 号中欧服务中心A1 栋 1 / 4 电话：4008-819-519 网址： 2 、需要实验者自行准备的试剂与仪器： •不同规格的移液器及相应的枪头 •酶标仪（450nm，620~650nm ） 【储存条件及有效期】 •试剂使用前避光密封，保存于2~8℃：有效期12 个月。 •试剂拆封后避光密封，保存于2~8℃：14 天内用完。 •生产日期和有效期：见标签。 【样本处理及要求】 1、人血清、人血浆及细胞培养上清液样本可直接测定。 2 、不能检测含叠氮化钠（NaN ）的样本，因NaN 会抑制辣根过氧化物酶（HRP ）的 3 3 活性。 3、样本采集后应尽早进行实验，若不能马上进行试验，可将样本储放于-20 ℃。 4 、尽可能的不使用溶血或高血