人工培养细胞疗法诞生.pdfVIP

BioEssays 30:897–903, _ 2008 Wiley Periodicals, Inc. 人工培养细胞疗法的诞生 Howard Green 张莉翻译，廖新化校译 摘要 很久以前我着手解决一个问题，但是在此过程中发生了一些未曾想到的事情 —我被一个意外的观察结果所吸引而转移了研究方向。从那时以后，随着我们对 实验材料（译者注：指培养的细胞）越来越了解，以及认识到这些材料的潜在应 用，我的研究方向在每个研究阶段都会在它们的指引下向前拓展。拓展的最后结 果就是人工培养细胞疗法的诞生。随后的进展很快催生了Biosurface Technology 公司的成立（后来它被Genzyme 公司收购）。这个公司在世界的许多地方为烧伤 患者提供自体培养的生物材料。通过其他科学家的进一步研究发展，角质形成细 胞的体外培养技术有了新的应用，比如眼部疾病的治疗和基因疗法。不幸的是， 在此期间已经出现了严重的过度监管的问题，这些问题威胁着这个技术应用在未 来的进一步发展。正如在这个简短的技术发展史中所描述的，用于治疗人类疾病 的细胞疗法在萌芽阶段能够得到发展，完全是因为那时没有来自于委员会或者政 府法规的限制。 角质形成细胞培养的开始阶段 在 1974 年，我还没打算要研究体外细胞疗法或者治疗人类烧伤。在那时， 当时的想法是：可以从培养的小鼠畸胎瘤中获取到更多的有关胚胎发育的信息。 总体来讲，这个愿望是没有完全实现的，但是对于我来说，研究如何培养由Leroy [1] Stevens 身上衍生的可连续移植的畸胎瘤，最终变成我的一项富有成果的事业 。 在这些与之后的成果风马不相及的研究过程中，我和我的研究生 James Rheinwald 注意到：当畸胎瘤细胞培养时，它们会在明显是成纤维细胞的背景中 形成看起来像是上皮细胞的有趣的克隆。我们试图获取纯的这种上皮细胞，但是 因为分离的细胞生长很差，我们并没有成功。为了支持这些细胞的生长，我们添 [2] 加了致死剂量辐射过的多年前在我们实验室培养的3T3 成纤维细胞 。在这种条 件下这些上皮细胞生长得非常好（如图 1）。3T3 细胞支持上皮细胞生长的能力 [3,4] 仅限于成纤维细胞 ,这不是简单的增加细胞密度的结果。 图1：来自小鼠畸形胚胎瘤的上皮细 胞系，的XB 细胞克隆，长在致死剂 量辐射的3T3 细胞上的情况。 那这些从畸胎瘤培养物中长出来的上皮细胞究竟是从哪里来的？当用电子 显微镜对细胞克隆的断层进行扫描观察时，发现这些克隆具有细胞桥粒、角质透 [4] 明蛋白颗粒和聚合的张力原纤维 。这些都是角质形成细胞的特征。角质形成细 胞是复层鳞状上皮细胞，比如表皮的主要细胞类型。 如果加入3T3 细胞的支持，我们可以让从小鼠畸胎瘤衍生的角质形成细胞培 养生长得非常好，那么我们能否也可以用相同的方法支持人的角质形成细胞的生 长？我知道人的角质形成细胞从未在体外培养得到显著的扩增。我们获得了一小 [5] 片人的皮肤，解离这些细胞并且将它们在3T3 细胞支持下进行培养 。单个的细 胞形成快速生长的克隆（如图 2 ）。紧接着的一系列培养方法的改进使得角质形 [6-11] 成细胞成为所有培养的人类细胞类型中在体外增殖最快的细胞 。我们现在