间充质干细胞对肝衰竭的治疗作用探讨-微生物与生化药学专业论文.docxVIP

摘要 摘要 万方数据 万方数据 摘 要 暴发性肝衰竭(FHF)是一种急性的严重肝功能衰竭，病情凶险，预后极差，目前 仍然是医学上最难解、最棘手的症候之一，在我国以常见的重型病毒性肝炎为典型代 表，死亡率达到 90%[1]。目前肝衰竭的治疗手段主要有内科药物治疗、人工肝治疗和 肝移植治疗。内科治疗尚无特效药且疗效有限，肝移植因供体来源短缺、免疫排斥、 移植费用高等诸多因素的限制，人工肝其疗效和安全性已经得到一定程度的肯定，但 肝细胞来源困难使国内外生物人工肝研究都陷入了低谷。 近年来，干细胞研究的快速发展为解决肝衰竭治疗的细胞来源问题带来了新的希 望。MSCs 最初在骨髓中发现[2-3]，因其具有自我复制以及多向分化潜能、造血支持和 促进干细胞植入、免疫调控等特点而日益受到人们的关注，已经被应用于多种疾病的 组织修复治疗与研究中。因此采用干细胞移植来修复、治疗急慢性肝衰竭患者，帮助 病患度过危险期并等待肝移植或直接修复衰竭的肝脏是一个经济又理想的方法。 本课题以 MSCs 的多向分化潜能和已能分化为肝细胞的实验为依据，以近年来的 被证明的免疫调节功能为重要线索，以肝衰竭的免疫发病机制为基础，进行以肝细胞 和 MSCs 进行二维共培养的实验，设计在建立合理的细胞损伤和动物肝衰竭模型的基 础上，探索 MSCs-肝细胞共培养上清对体外培养 L02 细胞的影响，以及 MSCs-肝细 胞共培养上清对肝衰竭动物的治疗情况。研究结果显示，共培养上清对 L02 有明显的 刺激增殖和损伤保护作用，表现为 L02 增殖活跃，总蛋白合成量增加；加入上述细胞 上清的酒精损伤 L02 细胞 AST、LDH 释放和细胞凋亡显著低于未加细胞上清的对照 组。同时，动物实验的结果也显示 MSCs-肝细胞共培养上清能有效降低 KM 小鼠的 死亡率，有效改善大鼠的肝功能。共培养组的 KM 小鼠的死亡率为 30%，明显优于 单独培养组，而对照组的小鼠的死亡率达到了 80%。采用抗体阵列的方法对不同的细 胞培养上清的成分进行了初步鉴定，结果显示 MSCs-肝细胞共培养上清中的 IL-1、 IL-6、IL-8 等细胞因子的量明显高于单独培养的肝细胞上清、MSCs 培养上清中的细 胞因子的量。 关键词：肝衰竭；间充质干细胞；肝细胞；共培养；细胞上清 抗体阵列 I Abstra Abstract Abstract Fulminant hepatic failure (FHF) is an acute severe liver failure, dangerous disease,the prognosis is poor, is still one of most difficult to treat in the medicine. In our countrythe ,A typical representative of the common is Severe viral hepatitis ，the mortality rate up to 90%. The treatment of liver failure Include medical therapy, artificial liver treatment and livertransplantation. It doest have Effective medicine to medical treatment, and efficacy is limited.Liver transplantation is limited due to the shortage of donor source, immune rejection and high transplant costs .Artificial liver support its efficacy and safety has been a certain degree of certainty,but the source of liver cells difficult to make bioartificial liver research into a trough at home and abroad . In recent years, the rapid development of stem cell research brings new hope to solve the problem of the source of the cells of the liver failure treatment. MSCs initially found in the bone marrow ,