甲型肝炎灭活疫苗纯化工艺及稳定性研究-免疫学专业论文.docxVIP

奎篓查簦璧壁奎兰皇誉篓兰壁耋整篓圭兰鎏兰 奎篓查簦璧壁奎兰皇誉篓兰壁耋整篓圭兰鎏兰 ～一————一 摘 要 甲型肝炎吠活疫凿具有良好的免疫原性羊Ⅱ安愈性，楼种人体后 髓诱导产生较离舔中窝抗体承平，敞俸持续辩阕长，可绦祷20军以 上，具礴广阚姻应羁翡景。 为了制备黼纯度的甲型肝炎灭活疫苗，适应溉模化生产的戮求， 我们对译望野炎瘘毒缒纯繁龌强遮糕进行了篆终傻纯，爱一在茈整毯 上探讨了氢氧化铝佐荆与HAV病毒黼白抗服的吸附条件以及试验疫 筵靛安全往秘稔定燕。 1．在条件参数控制下，优化的纯化过程；HAV感染细胞(舄一8 痰骜铩蝰养子KMBl7鳃驻)缀冻融怒声缓碎裘解一核酸酶游纯(潲豫 PNA—HAV聚集体)一淤剡抽提一PEG沉淀浓缩一弱明离子拄屡艟一 透析靛熬一除罄过滤。 此优化条件T剿冬的实验疫莛络巢重笺蝗抒，缝凄怒PAGE逛 泳。95．O％)，细胞杂谶自去除率为99．89％，HAV占病毒原液总溅自 爨戆0。I强左右，并枣鞍窿趣瘸霉霾获率(避犍蘸螽运90％左砉)。照 工艺经中试放大。结聚稳定。 2。鼹苓霾浓度鹣PBS窝生理热永、不溺狡辩潺魔襄暖瓣瓣藤， 摸索HAV病毒磷自与氯氧化锅佐剂的最佳吸附条件。结果表明，在 暇醛过稔串应当严稽掩耩磷酸穰离子浓度，2mMPBS或生蟋盐水均淹 逑宣的缓冲液；吸附0。5小对与2小对吸雕率无熬裂，瀑瘦对嫩驸 秃影响。 3。绞上述工艺生产鼹甲型翳炎实验疫菇，逡蟹37C热稳定瞧试 验和安龛试验，结果表明，实验疫黼640EU／ml剂量组髓37℃28 灭与37℃0天小藏效力试验结票冤鼷显差辩，鞫一拣凌蕊三个栉；镣 小鼠效力试验结果无明显差异，安金性好。此吸附工艺嫩产的疫街 串毽旃释鞋科太学串謇嚣学辩学骧赣士受论文稳定憋、均一蛙好。该安羧萤矮商良好豹安全渡、小鼠免疫琢性露 串毽旃释鞋科太学串謇嚣学辩学骧赣士受论文 稳定憋、均一蛙好。该安羧萤矮商良好豹安全渡、小鼠免疫琢性露 热稳定性。 关键诞： 学型骶灸灭涎痰蕊；缝纯；羧瓣条磐；热稳定戆 薅 孛嚣磐辩鞋辩丈攀串攘嚣学耧攀麓鹱圭燮埝交轰bstract 孛嚣磐辩鞋辩丈攀串攘嚣学耧攀麓鹱圭燮埝交 轰bstract Inactivated hepatitis A vaccine has highly immunogenicity and safety in preventing HAV infection。强is estimated that the persistence of anti-HAV neutralizing antibody following vaccination may be at least 20 years Therefore it has well praeticat application， In order to prepare a highly purified inactivated hepatitis A vaccine and to meet the requirement fof industrial scale manufacture，we optimized the ptlfifiG裤tion 8谨鑫tegy and scheme-further researched the adsorption condition between aluminum hydroxide and HAV蛰r。￡霉i携 antigen，as well as the heat stability of inactiv撞ted HAV vaccine。 t．Under the eontro!of purification para撼etefs，the 。ptimized purifieation scheme for hepatitis A WaS：iy§嚣￡e套擎 螽eeze_thawing and sonieation(KMB。1 7 cell infect。d bv Lu-8 8train)4 nuclease treatment to avoid the interferen。嚣of HAVwPNA(poly nucleic acid)CHCl3 ex打最etio赣。．PEG preei爹iration— anion exchange—di薅1擎si鏊 diafiltration． j 中国协和医科大学中国医学科学院硕士生论文These 中国协和医科大学中国医学科学院硕士生论文 These experimental process result in a more consistent performance and a higher yield