解淀粉芽孢杆菌.docVIP

生防菌解淀粉芽孢杆菌研究进展 吴一晶，林艺芬，林河通，等 （包装与食品机械，2012，30（6）: 49-52） 解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)，属于芽孢杆菌属(Bacillus sp.)，是一种具有广谱抑菌活性的细菌，具有较强的次生代谢产物产生能力，能产生多种抑菌物质。 1 解淀粉芽孢杆菌生物学特性 解淀粉芽孢杆菌，需氧，革兰氏染色阳性，呈短杆状(0.7~0.9μm×1.8~3.0μm) ，具有运动性，中生椭圆形孢子。硝酸盐还原阳性，接触酶阳性，水解淀粉，液化明胶，吲哚试验阴性，V-P 反应阴性，甲基红反应阴性。Luria-Bertani 液体培养基中形成菌膜，在固体培养基上菌落呈淡黄色，不透明，表面粗糙，边缘不规则。 解淀粉芽孢杆菌抑菌物质的提取、分离方法主要有大孔树脂法、酸碱沉淀法、硫酸铵沉淀法、色谱法等。经研究发现，解淀粉芽孢杆菌的抑菌物质主要是抑菌蛋白、脂肽类物质和聚酮化合物等。 1抑菌蛋白 张宝俊等采用盐酸沉淀法提取解淀粉芽孢杆菌 LP-5 发酵液的抗菌粗蛋白，并用 DEAE-52离子交换层析和 Sephadex G-100 凝胶层析进行纯化，得到一种等电点为 6.33、分子量为 20.3 kD的抗菌蛋白。刘俏等采用截留分子量为 70 000的双酚 A 型聚砜中空纤维膜超滤提取解淀粉芽孢杆菌活性蛋白。 2 脂肽类物质 信珊珊等利用红外吸收光谱法对解淀粉芽孢杆菌 WH1 产抗菌活性物质进行了鉴定，推测其抗菌物质为 Surfactin 类脂肽。Caldeira 等利用LC-ESI-MS 和抗真菌试验相结合的方法，发现解淀粉芽孢杆菌 CCMI 1051 的抗菌物质为具有抗真菌活性的 Iturin 和 Surfactin，其分子量为 1000~1100 Da。Yu 等应用 FAB MS/MS CID 分析表明，具有抑制立枯丝核菌( Rhizoctonia solani) 的解淀粉芽孢杆菌 B94 的有效成分为 3 种 Iturin A 的同分异构体。Rao 等应用 HPLC 和 MEKC 方法研究了解淀粉芽孢杆菌 B128 的抑菌成分，结果表明其抑菌成分为 Iturin A，且应用 RP-HPLC能很好地分离出 Iturin A 的同分异构体。 邓建良等通过 PCR 技术探索脂肽抗生素合成酶的相关基因，利用酸沉淀法制备活性粗提物，最后通过 HPLC-ESI-MS 和 MALDI-TOF-MS 对抗菌粗体液中活性物质进行定性定量分析，发现其抑菌成分主要是 C14-Fengycin A、C16-Fengycin A、C17-Fengycin A、C17-Fengycin B 和 C16-Iturin A 等 5 种脂肽抗生素。Chen 等利用酸沉降法得到抑菌粗提物，再通过生物活性制导分馏、真空闪蒸色谱法、半制备型高效液相色谱纯化，最后利用 Q-TOF-MS 分析表明其抑菌成分为 C16-Fengy-cin A 及一种新的 6-Abu Fengycin。 3 聚酮化合物 聚酮化合物也是解淀粉芽孢杆菌重要的一类抑菌物质。有关学者从分子水平上对解淀粉芽孢杆菌抑菌相关基因进行了研究。Chen 等分析了解淀粉芽孢杆菌 FZB42 全基因组序列，揭示了FZB42 含有可编码具抗菌作用的聚酮化合物的基因 mln，bae 及 dfn。 解淀粉芽孢杆菌具有较广的抑菌谱，对多种果蔬采后病原菌具有抑制作用，是一种新型保鲜技术，它具无污染、不产生抗药性、有利于人体安全等优点，有较好的发展前景。 一般认为解淀粉芽孢杆菌的抑菌机理有如下几个观点: ( 1) 产生抑菌物质。解淀粉芽孢杆菌主要通过产生对病原菌菌丝生长具有抑制作用的物质来达到保鲜的作用。( 2) 诱导抗病性。应用拮抗微生物处理果实，可导致寄主产生形态学上的改变，同时引发生理生化变化，进而引起寄主植物蛋白组和抗病相关基因表达水平的变化等。(3) 与病原菌竞争生存空间与营养物质。( 4) 与病原菌直接作用。除了产生抗菌素等次级代谢产物外，拮抗菌还会产生一系列对病原菌抑制起到重要作用的胞外水解酶。此外，有些拮抗菌会在病原菌菌丝上定殖，促使菌丝裂解。 解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）的研究进展 车晓曦，李校堃 北京农业 2010 年 1 月 7-10 解淀粉芽孢杆菌发酵条件与培养基配方优化的研究 最终确定关键因子为葡萄糖、L-谷氨酸钠、转速和温度。 最佳组合为葡萄糖 42.00 g/L、L-谷氨酸钠 14.00 g/L、温度 27℃ 培养基组分与发酵条件如下：蔗糖为 0.25%、黄豆粕粉为 1.50%、MgCL2 为 0.01%、MnSO4为 0.01%、种龄 12.00 h、接种量 4.00%、 装瓶量 100 mL/2