低氧激活HIF1α抑制人牙周膜成纤维细胞的成骨分化-口腔疾病防治.PDFVIP

·488 · 口腔疾病防治 2017年8月 第25卷 第8期 ［DOI］10.12016/j.issn.2096⁃1456.2017.08.003 ·基础研究 · 低氧激活HIF⁃1α抑制人牙周膜成纤维细胞的成 骨分化 1 1 1 2 庞静雯 ， 吴亚霖 ， 徐婷 ， 庄秀妹 1.广州市海珠区口腔医院，广东广州（510220）；2.中山大学附属孙逸仙纪念医院口腔科，广东广州（510120） 【摘要】 目的 探讨低氧环境对人牙周膜成纤维细胞（periodontalligamentcells，PDLCs）成骨分化的影响，以 及低氧诱导因子⁃1α（hypoxiainduciblefactor⁃1α，HIF⁃1α）在该过程中的作用。方法 组织块法原代分离牙周 膜标本中PDLCs，采用激光共聚焦检测波形蛋白与细胞角蛋白表达。PDLCs分别在常氧（20%体积分数O ）培 2 养以及低氧（1%体积分数O ）培养12～72 h，检测常氧组与低氧组PDLCs碱性磷酸酶（alkalinephosphatase, 2 ALP）活性，比较成骨标志物ALP、I型胶原（Collogen⁃1，COL1）、成骨特异性转录因子（runtrelatedtranscription factor2,RUNX2）的mRNA表达量变化，Western免疫印迹检测HIF⁃1α表达水平。进一步转染小干扰RNA（HIF⁃ 1α⁃siRNA 1，2），检测低氧环境中PDLCs的HIF⁃1α水平、ALP活性与成骨标志物mRNA表达变化。采用 SPSS 13.0软件包对数据进行统计学分析。结果 组织块法成功获取PDLCs，PDLCs中波形蛋白阳性表达、细 胞角蛋白阴性表达。低氧环境中培养48h后PDLCs中ALP活性下降，ALP、COL1、RUNX2的mRNA表达量显 著降低，但HIF⁃1α蛋白表达升高。HIF⁃1α⁃siRNA成功敲低PDLCs中HIF⁃1α表达，敲低HIF⁃1α的PDLCs在低 氧环境中的ALP活性升高，ALP、COL1、RUNX2的mRNA表达量增加。结论 长时间低氧处理能抑制PDLCs 成骨分化，敲低HIF⁃1α表达可逆转低氧对PDLCs成骨分化的抑制作用。 【关键词】 牙周炎； 人牙周膜成纤维细胞； 低氧； 成骨分化； 低氧诱导因子⁃1α 【中图分类号】 R781.4 【文献标识码】 A 【文章编号】 2096⁃1456（2017）08⁃0488⁃06 【引用著录格式】 庞静雯,吴亚霖,徐婷,等.低氧激活HIF⁃1α抑制人牙周膜成纤维细胞的成骨分化[J].口腔 疾病防治,2017,25(8):488⁃493. Effectsofhypoxicconditiononosteogenicdifferentiationofhumanperiodontalligamentcellsviahypoxiain⁃ 1 1 1 2 duciblefactor⁃1α PANGJingwen,WUYalin,XUTing,ZHUANGXiumei. 1.GuangzhouHaizhuDistrictHospi⁃ talofStomatology,Guangzhou 510220,China;2.DepartmentofStomatology,SunYat⁃senMemorialHospitalAffiliated toSunYat⁃senUniversity,Guangzhou510120,China Correspondingauthor:ZHUANGXiumei,Email:zxmsysu@163.com,Tel:0086⁃20