木香烃内酯对人胆管癌RBE细胞生物学行为的影响及其作用机制.PDF

中国肿瘤生物治疗杂志 Chin J Cancer Biother, Jul. 2018, Vol. 25, No. 7 ·687 · DOI：：10.3872/j.issn.1007-385x.2018.07.005 ∙基础研究∙ 木香烃内酯对人胆管癌RBE 细胞生物学行为的影响及其作用机制 林雪晶，刘春颖，彭章晓，孙斌，吴孟超，苏长青（第二军医大学 东方肝胆外科医院 分子肿瘤实验室 国家肝癌 科学中心，上海 200438 ） [摘 要] 目的：探讨木香烃内酯（costunolide ，Cos）对人肝内胆管癌RBE 细胞生物学行为的影响及其作用机制。方法：以不 同质量浓度（0 、2 、4 、6 、8、12、16、20 μg/ml）Cos 作用RBE 细胞，通过CCK-8 法、流式细胞术分别检测Cos 对细胞增殖能力和周期分 布的影响，Annexin V-FITC/PI 双染法、Transwell 小室实验分别检测Cos 对细胞凋亡和迁移侵袭的影响，qRT-PCR 检测与侵袭相关 因子MMP2 、MMP9 mRNA 的表达，Western blotting 检测PI3K/AKT 信号通路相关蛋白的表达。结果：Cos 能够显著抑制RBE 细 胞的增殖活性（P0.05 或P0.01) ，阻滞细胞周期于S、G2/M 期，同时诱导RBE 细胞的凋亡(P0.01) 、且呈质量浓度依赖性，Tran- swell 及qRT-PCR 结果显示Cos 能够显著抑制RBE 细胞的侵袭能力、降低侵袭相关转录因子MMP2 和MMP9 mRNA 的表达， Western blotting 结果显示Cos 明显抑制p-AKT 、Bcl-2 、MMP2 及MMP9 的表达，但促进Bax 的表达。结论：Cos 通过抑制PI3K/ AKT 信号通路降低胆管癌RBE 细胞的增殖、迁移及侵袭能力。 [关键词] 木香烃内酯；胆管癌；RBE 细胞；细胞增殖；迁移；侵袭；PI3K/AKT 信号通路 [中图分类号] R735.8 ；R730.54 [文献标识码] A [文章编号] 1007-385X （2018 ）07-0687-06 Effects of costunolide on the biological behaviours of cholangiocarcinoma RBE cells and its mechanism LIN Xuejing, LIU Chunying, PENG Zhangxiao, SUN Bin, WU Mengchao, SU Changqing （Department of Molecular Oncology, East- ern Hepatobiliary Surgical Hospital National Center of Liver Cancer, Second Military Medical University, Shanghai, 200438, China） [Abstract] Objective: To investigate the effects of costunolide (Cos) on the proliferation, apoptosis, migration andinvasion of cholan- giocarcinoma RBE cells, and explore its potential mechanism. Methods: The CCK-8, flow cytometry, Annexin V-FITC/PI double stain- ing, Transwell assays were used to examine the influence of Cos on proliferation, cell cycle, apoptosis, migration and invasion of RBE cells after treated with gradient concentrations of Cos. The expressions of MMP2 and MMP9 were detected by qRT-PCR, and the ex- pression of PI3K/AKT-associated signal proteins was detected