姜黄素衍生物抑制结肠癌细胞增殖侵袭作用-外科学专业论文.docxVIP

2012 年 5 月 广 州 医 学 院 硕 士 学 位 论 文 姜黄素衍生物抑制结肠癌细胞增殖侵袭作用 The roles of curcumin derivatives in the proliferation and invasion of human colon cancer cell line Lovo and SW480 研究生：何利兵 导 师：张继民 教授 专 业：胃肠外科 广州医学院 2012 年 5 月 广州医学院硕士学位论文姜黄素衍生物抑制结肠 广州医学院硕士学位论文 姜黄素衍生物抑制结肠癌细胞增殖侵袭作用 PAGE PAGE 1 目录 中文摘要 ????????????????????????????3 英文摘要 ????????????????????????????5 前言 ??????????????????????????????7 材料与方法 ???????????????????????????10 结果 ??????????????????????????????16 讨论 ??????????????????????????????20 参考文献 ????????????????????????????23 文献综述 ????????????????????????????26 致谢 ??????????????????????????????35 学位论文原创声明 ????????????????????????36 学位论文知识产权权属声明 ????????????????????36 关于学问论文使用授权的说明 ???????????????????37 主要英文缩略语 Cur NF-κB TNF-α Curcumin Nuclear factor-kappa-B Tumor necrosis factor-alpha 姜黄素 核转录因子 肿瘤坏死因子 FBS NBS Fetal bovine serum New-born bovine serum 胎牛血清 新生牛血清 PBS OD PI Phosphate buffer solution Optical density Propidium Iodide 磷酸盐缓冲液 光密度 碘化丙啶 DMSO Dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 MTT 3-[4, 5-dimethylthylthiazol-2-yl]- 2, 5 diphenyl- tetrazolium bromide 四甲基偶氮唑蓝 IC50 half maximal inhibitory concentration of a substance 半抑制浓度 姜黄素衍生物抑制结肠癌细胞增殖侵袭作用 中文摘要 姜黄素是从天然植物姜黄中提取的一种酚类化合物，具有抗炎及抗氧化双重作 用。已有研究证实姜黄素通过抑制肿瘤血管生成对多种人类肿瘤具有抑制作用。然而 姜黄素水溶性差、易水解、不稳定，口服吸收后迅速被肝脏代谢，首过消除现象明显 致使其生物利用度低；而姜黄素的衍生物能有效提其高生物利用度，增强抗肿瘤效能。 本研究探讨姜黄素及其 4 种衍生物（T316、T62、T63、T6F4）对结肠癌细胞株 Lovo 和 SW480 增殖、迁移能力及诱导癌细胞凋亡能力的影响；并将姜黄素和 4 种衍生物 的抗结肠癌作用进行了比较。 目的：研究姜黄素（Curcumin，Cur）及其 4 种衍生物（T316、T62、T63、T6F4）对 结肠癌细胞株 Lovo 和 SW480 的毒性作用及增殖迁移能力的影响，并初步探讨其作用 机制。 方法：（1）利用低浓度（0.125μmol/L～32μmol/L）的姜黄素及 4 种衍生物作用于 人结肠癌细胞株 Lovo 和 SW480 48h 后，通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色检测姜黄素 对这两株肿瘤细胞生长抑制能力的影响；（2）采用细胞划痕实验检测姜黄素及 4 种衍 生物对人类两株结肠癌细胞 24 小时内迁移作用的影响；（3）利用软琼脂克隆实验检 测姜黄素及 4 种衍生物对人类两株结肠癌细胞克隆增殖能力的影响；（4）PI 单染流 式细胞技术检测姜黄素及其 4 种衍生物对结肠癌细胞凋亡能力的影响；（5）荧光素酶 报告基因检测姜黄素及其 4 种衍生物对 TNF-α诱导下结肠癌细胞内核转录因子（NF- κB）信号通路的影响。 结果：0.125μmol/L～32μmol/L 浓度范围内 Cur 对 Lovo 株和 SW480 株细胞的生长 抑制率随药物的浓度升高而增大，呈剂量依赖关系；0.125μmol/L～10μmol/L 浓度 范围内 T316、T62、T63、T6F4 对 Lovo 株和 SW480 株细