姜黄素对缺氧复氧诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用-内科学(心血管病)专业论文.docxVIP

笙型墨茎堕塑主堂堡垒查姜黄素对缺氧复氧诱导人脐静脉内皮细胞损伤的 笙型墨茎堕塑主堂堡垒查 姜黄素对缺氧复氧诱导人脐静脉内皮细胞损伤的 保护作用 中文摘要 目的 观察姜黄素(curcumin，cuO对缺氧复氧诱导人脐静脉内皮细胞株 (HUVEC)内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)、诱导 型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)及一氧化氮(Nitric Oxide， NO)表达的调节作用，探讨姜黄素对内皮细胞缺血再灌注损伤的保护作用机制。 方法建立缺氧／复氧(hypoxia／reoxygenation，H／R)损伤模型，分为J下常对照组； H／R损伤模型组；H／R损伤+Cur预处理组。使用MTT法检测不同的缺氧和复氧时 间对HUVEC的损伤作用及Cur的干预对HUVEC的生存率影响。使用化学法测定 eNOS、iNOS的活性，亚硝酸还原法检测NO的表达情况。 结果 (1)缺氧损伤对HUVEC活性的影响 与J下常对照组相比，HUVEC 缺氧2h复氧2h(H2R2)的生存率下降到80％左右，缺氧铀复氧4h(H4R4)的生存 率下降为70％左右，而缺氧6h复氧6h(H6R6)模型的生存率就下降至60％左右， 缺氧12h以后，细胞由原本的贴壁生长状态变为不大贴壁、圆缩并呈杂乱分布， 几无结晶生成。 (2)Cur对HUVEC H／R损伤的保护作用03Cur对HUVEC H6R6损伤 模型有保护作用，此作用在较小剂量范围内时呈剂量依赖型，Cur浓度低于5 u M 时细胞生存率呈上升趋势，且在剂量为5 u M时细胞存活率达到115％左右，剂量 大于lO u M浓度时，保护作用呈逐渐降低趋势。②不同缺氧复氧模型(H2R2， H4R4，H6R6)加用浓度为5 u M的Cur作用于HUVEC时，细胞生存率较单纯缺 氧复氧时明显增高。 (3)Cur对HUVEC NO含量、NOS活性的影响Cur处理细胞4h，8h， 12h，NO含量与对照组相比均无明显差异；细胞eNOS和iNOS活性与对照组相比 ．2． 徐州医学院硕士学位论文均无明显变化。 徐州医学院硕士学位论文 均无明显变化。 (4)不同缺氧复氧时间对HUVEC NO含量、NOS活性的影响：①用缺氧 复氧模型处理HUVEC H2R2，H4R4，H6R6，培养液上清中的NO含量随时间的 延长而逐渐升高，与对照组相比均有明显差异；细胞iNOS活性随时问延长而逐渐 升高，与对照组相比均有明显增加，eNOS活性与之相反，随着时间的延长呈下降 趋势②模拟缺氧处理HUVEC H6R2，H6R4，H6R6，H6R8，H6R12，H6R24培养 液上清中的NO含量随复氧时问的延长而逐渐升高，H6R6时达到最高值，然后出 现下降的趋势，与对照组相比均有明显差异：细胞iNOS活性与NO的含量有类似 的趋势；eNOS活性随复氧时间的延长逐渐下降，与对照组相比均有明显降低 (5)Cur+I-I／R对HUVEC NO含量、eNOS和iNOS表达的影响Cur(5 la M)+H2R2，H4R4，H6R6处理HUVEC，NO含量随缺氧复氧的时间增加而增 高，比H／R处理时相比明显降低，与对照组相比略增高；iNOS与H／R处理相比明 显下降，与对照组相比均有明显增加；eNOS活性与H／R处理相比时明显增高，但 与对照组相比有明显降低。 结论 (1)缺氧复氧可诱导HUVEC iNOS表达增强，使iNOS活性增加， NO生成增多，损伤HUVEC； (2)Cur对正常状态HUVEC的NOS活性和NO生成无明显影响，但 Cur可通过抑制缺氧诱导的iNoS表达，使iNOS活性减低及NO的生成减少，起 到保护HUVEC的作用 关键词姜黄素：人脐静脉内皮细胞；缺氧复氧；一氧化氮；内皮型一氧化 氮合酶；诱导型一氧化氮合酶 Protection Protection Effect of curcu min on hypoxia／reoxgen ation ·-induced human umbilical vein endothelial cells inj uries Abstract objective To observe expression and regulatory effects of curcumin(Cur)on endothelial nitric oxide synthase(eNOS)，inducible nitric oxide synthase(iNOS)， NO(Nitric Oxide)，which directed by ischemia／reperfusion(I／R