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重庆医科大学硕士研究生学位论文姜黄素对人乳腺癌细胞的抑制作用及其光照增强效果
重庆医科大学硕士研究生学位论文
姜黄素对人乳腺癌细胞的抑制作用及其光照增强效果 的观察幸
摘 要
背景和目的:乳腺癌仍然是威胁女性健康和生命的重要因素,寻 找新的有效的治疗方法和治疗药物是解决这一问题的可行途径。光动 力治疗是近年来兴起的治疗肿瘤的一种新方法。其原理是利用光敏剂 能选择性地富集在肿瘤组织中,在相匹配光源激发下,发生一系列光 化学反应,从而抑制和杀伤肿瘤细胞。姜黄素作为一种染料和食用色素 具有悠久的历史,目前人们发现姜黄素不仅是一种广谱抗癌药,而具 还具有光敏活性,是种潜在的中草药光敏剂。本实验以人乳腺癌MCF.7 细胞为研究对象,观察姜黄素对其的抑制作用,在明确姜黄素抑癌规 律的基础上,利用实验研制成功的特异光源进一步观察光敏化姜黄素 对乳腺癌MCF.7细胞抑制作用的增强效果,从而为姜黄素的临床应用 提供理论支持,同时探索姜黄素作为一种新型光敏剂的可能性和应用
—1L
刚彖。
方法:(1)实验设8个组,正常对照组和7个实验组,7个实验 组分别给予59M、10PM、201.tM、30t.tM、401.tM、601xM、809M的姜黄 素处理,采用MTT比色法、电镜观察等方法分别进行检测,研究不同 浓度姜黄素对人乳腺癌MCF.7细胞的抑制作用,明确姜黄素抑癌规律。
’本课题受国家自然科学基金资助
重庆医科大学硕士研究生学位论文(2)在此基础上,建立体外光照系统,设正常对照组、单纯光照组、
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(2)在此基础上,建立体外光照系统,设正常对照组、单纯光照组、 单纯姜黄素作用组和光动力实验组,采用MTT比色法和Hoechst 33258 染色法进行检测,研究在特定时间内,光照对一定浓度姜黄素抑癌作用 的增强效应。
结果:(1)正常对照组的光密度(Optical density,OD)值为
1.243+0.253,各实验组的OD值依次是1.212+0.224、1.055+0.236、
O.711+0.179、O.601+0.108、0.379+0.086、0.342+0.079、0.242+0.041。
可见随着姜黄素浓度的增加, OD值逐渐降低;电镜也观察到随着姜 黄素浓度的增加细胞器的改变逐渐明显,死亡细胞逐渐增多。(2)MTT 比色法检测,得到正常对照组的OD值是1.561+0.278;各单纯光照组 的OD值分别是1.322+0.195、1.289+0.126、1.295士0.113、1.30010.210、 1.135+0.084、1.260士0.220:单纯姜黄素作用组的OD值是1.179+0.200 和0.927士0.200;光动力实验组OD值分别是0.665士0.146、O.597土0.144、 0.597士0.142、0.536+0.049、0.37010.132、0.131土0.3 18和0.343+0.063、
O.286土O.059、0.18710.022、0.185士0.060、0.135土0.02l、O.116+0.014。
发现在有姜黄素存在的前提下,OD值与姜黄素的浓度和光照时间成反 比,单独光照对细胞的影响不明显。Hoechst 33258染色仅光动力实验 组可见明显细胞凋亡和坏死,正常对照组、单纯光照组、单纯姜黄素 作用组三组间未见明显差异。
结论:1,姜黄素能显著抑制人乳腺癌MCF.7细胞增殖并且随着 姜黄素浓度的增加这种抑制作用也随之增强。2,光照能明显增强姜黄 素对人乳腺癌MCF.7细胞的抑制作用,因此姜黄素光动力作用有望发
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