姜黄素对人舌鳞癌Tca8113细胞抑制作用的实验研究-口腔临床医学专业论文.docxVIP

摘螫 摘螫 郑州人学2007届硕I：tJf究生毕业论立 路和借鉴。 材料与方法 人舌鳞癌细胞株Tca8113由上海交通大学口腔医学院提供，姜黄素由上海 友思生物技术有限公司生产。将Tca8113细胞培养于普通的RPMI．1640培养基 中，实验组用含有不同浓度姜黄素(5I_unol／L，10¨mol／L，209mol／L，40pmol／L) 的培养基进行培养，对照组细胞正常培养，至规定时问终止培养，进行各项指 标检测。采用倒置显微镜观察细胞形态的变化，MTT法检测其生长抑制效应， 流式细胞术分析细胞周期变化和细胞凋亡，定量分析Caspase-3表达的变化，免 疫细胞化学染色观察Survivin、Ki一67、Bax等基因表达的变化，统计分析应用 SPSSl3．0软件，采用重复测量方差分析、，检验进行统计学处理，取a=0．05为 显著性检验水准。 结果 (1)随着姜黄素浓度升高与作用时间的增加，其对细胞的生长、增殖抑制作 用明显增强，在倒置显微镜下观察可见细胞生长增殖变慢、细胞形态变圆、变 小，脱壁比细胞越来越多，漂浮在培养基中。MTT法检测结果显示姜黄素对细 胞抑制效应有浓度、时间依赖性。 (2)随着姜黄素浓度升高、作用时间的增加，细胞周期中Gl期细胞比例逐渐 增加，由46．20％上升到64．80％，S期细胞比例由53．10％下降到31．40％。不同 浓度之间、不同时间之间对细胞Gl期的阻滞作用有明显差异性(P0．05)。 (3)随着姜黄素浓度升高、作用时间的增加，凋亡细胞比例逐渐增高，由1．80％ 上升到22．27％。不同浓度之间、不同时间之间对细胞凋亡率对改变有明显差异 性(PO．05)。 (4)姜黄素作用TcaSll3细胞后，细胞中凋亡抑制基因Survivin与核增殖抗原 l(i．67蛋白表达下降，与对照组相比Survivin在胞浆的着色减轻、鼬一67在胞核 着色减轻，促凋亡基因Bax与促凋亡蛋白酶Caspase-3的表达明显增强，Bax 在细胞浆着色增强，蛋白定量分析Caspase．3表达量增加。 结论 (1)姜黄素能明显抑制TcaSll3细胞的生长、增殖，并有浓度、时间依赖性。 (2)姜黄素能改变TcaSll3细胞的周期分布，有明显Gl期阻滞作用，并有量 Ⅱ 郑州人学2007届硕．卜研究生毕业论文 郑州人学2007届硕．卜研究生毕业论文 摘要 一效浓度、时一效关系。 (3)姜黄素可使Tca8113细胞的凋亡率增加，并有量一效浓度、时一效关系。 (4)姜黄素可下调Tca8113细胞中凋亡抑制基因Survivin、核增殖抗原Ki．67 的表达，上调促凋亡基因Bax、促凋亡蛋白酶Caspase-3的表达。 (5)细胞周期阻滞、凋亡抑制基因Survivin，核增殖抗原l(i．67表达的下降， 促凋亡基因Bax和促凋亡蛋白酶Caspase-3表达的增强，可能是姜黄素对 Tca8113细胞抑制作用的机制之一。 关键词：姜黄素；Tca8113细胞；增殖；细胞周期； 凋亡 lit 摘要 摘要 郯州大学2007届硕f‘研究生毕业论文 The study on inhibitory effects of curcumin oil human tongue squamous cell carcinoma Tca8113 cells Postgraduate Zhao De—qiang Tutor Li Xin—ruing Department ofOral and Maxillofacial Su喀ery， The First Affiliated Hospital ofZhengzhou University, Zhengzhou，China 450052 Abstract Background and Objective Tongue squamous cell carcinoma is comlnon malignant ttlmor of oromaxillo—facial region， and its constituent is the higheSt in oral squamous cell carcinoma,it is reported the ratio is about 32-3％in 0111nalion and between 21％and 52％in Europe and America．In recent yearS,the incidence of tongue squamous cell carcinoma shows rapid upward trend，which has attracted national attention．Fast-growing and high invasion