姜黄素对顺铂所致大鼠肾毒性的防护作用及其可能机理-劳动卫生与环境卫生学专业论文.docxVIP

姜黄素对顺铂所致大鼠肾毒性的 姜黄素对顺铂所致大鼠肾毒性的 防护作用及其可能机理 硕士研究生：李昱辰 指导教师：仲来福 教授 专业名称：劳动卫生与环境卫生学 摘 要 前言 顺铂(Cis．diamminedichloroplatinum，CDDP)是当前临 床上应用较广泛的一种肿瘤化疗药物。目前在美国和加拿大推荐的癌 症治疗药物中，CDDP在头颈部癌、睾丸癌、卵巢癌等18种癌症中被 推荐为首选药物，在其他许多癌症治疗中还作为二线药物。在我国的 多种癌症治疗中，CDDP也作为首选药物。CDDP虽然是一种有效的肿 瘤化疗药物，但其毒副作用，如耳毒性、骨髓毒性、肝毒性和肾毒性 等，特别是肾毒性也是十分严重的。深入探讨CDDP肾毒性的机理以 及寻求有效的化学防护剂一直是CDDP毒理学研究的热点。CDDP所 致肾毒性的确切机理迄今尚不清楚，但大量最新实验研究表明，CDDP 可诱导氧化应激；CDDP可与DNA碱基的氮原子形成稳定的Pt．DNA 加合物，其中链内交联是Pt．DNA加合物的主要形式。姜黄素 (Curcumin，CMN)是中药姜黄(Curcumalonga L．)中的酚类色素成分， 具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎等广泛的药理作用，而且毒性很低。CMN 能有效抑制实验动物皮肤癌、胃癌、肠癌及乳腺癌的生长。近年来报 道， CMN能诱导体外培养的MGC803、Bel7402、Bfl6、K562／ADM 等肿瘤细胞凋亡。有关研究表明，CMN是铁催化的磷脂过氧化反应的 抑制剂，能抑制铁催化的大鼠肝微粒体的脂质过氧化反应，而且其抗 氧化作用比a-生育酚还强。另外，CMN可抑制DNA加合物的形成， 使加合物的含量下降，从而保护DNA等细胞大分子。 本实验通过体内和体外实验，试图从氧化应激及DNA损伤两方面 本实验通过体内和体外实验，试图从氧化应激及DNA损伤两方面 探讨CDDP的肾毒性机理，并以CIVLN为干预物，研究其对CDDP肾 毒性的防护效果，为其应用于临床，从而提高化疗效果提供实验依据。 方法 体内实验，以成年健康雌性Sprague．Dawlcy(SD)大鼠为 研究对象，将大鼠按体重随机分为六组，每组7只。各组及其处理如 下：(1)对照组：连续三天灌胃(ig)与CMN组等容量生理盐水(NS)，第 二次ig后lh一次腹腔注射(ip)与CDDP组等容量NS；(2)CMN组：连 续三天ig CMN 80mg／kg，第二次ig后1h一次ip与CDDP组等容量NS； (3)CDDP组：连续三天ig与CMN组等容量NS，第二次ig后1h一次 ip 5．5mg／kg CDDP(4)CDDP+CMN低剂量组：连续三天ig 20mg／kg CMN，第二次追后1h一次ip 5．5mg／kg CDDP：(5)CDDP+CMN中剂 量组：CMN剂量40mg／kg，其处理同(4)组；(6)CDDP+CMN高剂量 组：CMN剂量80mg，kg，其处理同(4)组。大鼠于给药后第l、3、5天 称体重，乙醚麻醉后下眼眶内眦静脉采血，并于第5天采血后处死动 物。观察指标包括：体重变化，肾脏系数，血清尿素氮(BUN)和肌 酐(SCr)，血清和肾皮质脂质过氧化产物丙二醛(MDA)，以及肾皮 质还原型谷胱甘肽(GSH)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH。Px) 活性、肾皮质铂(Pt)含量，肾组织形态学观察。体外实验，采用荧 光法研究CDDP对LLC．PK。细胞DNA交联的情况，并观察CMN 的干预的影响：采用MTT比色法研究CMN对CDDP体外抑制肿 瘤细胞SCaBER、H0．8910PM生长的影响。 结果 CDDP 5．5 mgg ip后第3、5天可引起明显的肾脏毒 性。表现为体重降低，BUN和SCr水平升高：第5天，肾脏系数 升高，血清和肾组织匀浆MDA水平升高，肾组织匀浆GSH含量 和GSH．Px活性下降，与对照组比较，统计学分析有显著性差异 (P0．05)，肾皮质Pt含量增高，组织形态学观察可见肾毒性急性肾 小管损害表现。CMN预处理可抑制给予CDDP后第3、5天出现的 上述毒性表现，尤其第5天预防作用显著，表明CMN的预处理能 预防CDDP所致急性肾损害和肾功能下降，但CMN低剂量组的防 护效果比中、高剂量组要好。体外实验，CMN能降低CDDP对 ·2‘ LLC．PKI细胞引起的DNA交联作用，并呈剂量依赖性。另外，CMN LLC．PKI细胞引起的DNA交联作用，并呈剂量依赖性。另外，CMN 对CDDP体外抑制肿瘤细胞SCaBER或HO．8910PM细胞增殖没有 明显影响。 结论 经口给予CMN可明显预防CDDP所致的肾毒性。 CDDP。肾毒性机理可能与氧化应激、DNA交联及肾组织中Pt的蓄 积有关。CMN预防CDDP肾毒性机理可能与CMN的抗氧化和清 除自由基活性有关