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实验五 培养基制备、消毒灭菌及微生物接种技术

实验五 培养基的制备、消毒灭菌及微生物接种技术 实验目的和要求: 了解配制培养基的原理,并掌握配制培养基的一般方法和步骤; 了解高压蒸汽灭菌的原理,并掌握其具体操作方法。 培养基 培养基(medium):由人工配制的适合微生物生长、繁殖或适合积累代谢产物的营养基质。 培养基的种类及其应用 按培养基的物理状态 固体培养基 固体状,通常在液体培养基中加入1.5~2%琼脂配制而成 分离、鉴定、计数、保藏等 半固体培养基 柔软的浆糨状,通常在液体培养基中加入0.2~0.7%琼脂配制而成 观察微生物的运动、分类鉴定及噬菌体效价测定等 液体培养基 液体状,未加任何凝固剂 工业大规模发酵生产及实验室生理、遗传等基础理论研究 培养基的配制过程 计算用量 称量 溶解 调pH 过滤 分装: 试管:固体:1/5试管;液体:1/4-1/5。 三角瓶:1/3-1/2 包扎 灭菌: 一般培养基, 121 0C, 15-30min; 含糖培养基: 112 0C, 15-30min; 易产生沉淀的物质:分别灭菌后再混合 摆斜面(固体,试管) 无菌检查 消毒与灭菌 干热灭菌:恒温干燥箱:160 0C 高压蒸汽灭菌 紫外线灭菌 过滤除菌 具体安排 每组另须准备如下用品 无菌培养皿15套 无菌移液管5支 无菌水49.5ml(三角瓶装,带玻璃珠) 土壤样品 烂水果1只 实验报告 P4:六;七(2) P10: 七(1,2) * 用途: 菌种分离、培养和分类鉴定; 菌种保藏; 生理生化性质的研究; 发酵生产 40支试管 p150-8 200 葡萄糖蛋白胨水培养基 1 20支试管 p151-10 200 糖发酵培养基 2 2个三角瓶(1000ml ) p152-26 800 依红-美蓝培养基 3 1个三角瓶 p154-142 200 淀粉培养基(固体) 4 2个三角瓶(1000ml ) p150-4 800 PDA(固体) 5 2个三角瓶(1000ml ) p150-2 800 高氏1号培养基(固体) 6 2个三角瓶(1000ml ) p150-1 800 牛肉膏蛋白胨培养基(固体) 7 40支试管 p150-1 250 牛肉膏蛋白胨培养基(固体) 8 分装 配方 数量(ml) 培养基名称 组 *

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