天津生物芯片.doc

天津生物芯片技术有限责任公司 PAGE PAGE 1 电话：0229590 email： HYPERLINK mailto:service.biochip@ service.biochip@ 网址： DNA测序收样收费标准 1、DNA测序样品规格要求 样品种类 样品要求 样品质量检测 收样与退样规定 贮存条件 活菌 单菌落 注明质粒抗性、抗生素浓度、质粒和宿主菌类型、插入片段大小；尽量提供穿刺培养或斜面培养的菌种（装在EP管中）。 观察菌落形态，有无异味，是否有杂菌污染，必要时对样品进行转板复苏。 菌落形态正常，无异味收样，否则退样。 4℃保存，不超过48小时 菌液 注明质粒抗性、抗生素浓度、质粒和宿主菌类型、插入片段大小；Eppendorf管一式两份（防止、体积1.2mL、OD6001.0。 观察菌液是否有杂菌污染，目测或离心菌液，检测菌体量是否可供质粒提取需要。 菌液颜色正常，离心菌体量可供质粒提取则收样，否则退样。 4℃保存，不超过24小时 质粒 注明质粒类型、插入片段大小；质粒溶于超纯水中（请勿溶解于TE缓冲液中）；浓度50-100ng/ul、总量不少于5μg；纯度OD260/280为1.6～2.0。 电泳检测：观察带型是否单一，有无降解迹象；OD检测：稀释30倍测OD，OD260为0.1～0.6，OD260/280为1.6～2.0。 电泳带型单一，无降解迹象，且OD检测符合要求则收样，电泳、OD两项检测任一项不符合要求均退样。 4℃保存，不超过24小时 PCR 产物 已纯化 样品溶于超纯水中（请勿溶解于TE缓冲液中）；浓度50ng/ul、体积大于40μl（5个反应以内），每加5个反应需增加40ul。片段长度不小于200bp 电泳检测：观察带型是否单一，有无降解迹象。 电泳带型单一，无降解迹象则收样；电泳带型不单一，有降解迹象均退样。 4℃保存，不超过24小时 未纯化 取2μl样品，电泳应能清晰分辨目的条带，体积大于150 ul（5个反应以内），每加5个反应需增加150 ul。 电泳检测浓度，带形。 测序 引物 自带 提供引物序列，浓度5pmol/ul，一般体积为15-50μl，根据反应次数不同而调整；随机引物和简并引物不适合测序。 稀释30倍测OD，OD2600.06。 OD检测符合要求则收样，否则退样。 4℃保存，不超过24小时 需要合成 提供引物序列，合成时间3－5天。 4℃保存 ⑵ 服务内容 单向：从插入片段一端进行测序反应 双向：从插入片段两端进行测序反应 测通：视插入片段大小而定：如进行单向测序能测通，则进行单向测序；如单向测不通，则进行双向测序；如插入片段过大，双向测序也无法测通，则再设计引物测序，直到测通为止（费用另计）。 2、DNA测序收费标准 测序中的工作项目及实验结果判读 可能原因 是否收费 备注 是 否 ? 成功或测通 √ ? 反应失败（无反应） 测序反应中实验操作和仪器等问题 √ 反应失败（无反应） 模板质量问题（浓度低，降解等） √ ? ? 反应弱或反应不佳 模板浓度低 √ 测序图谱中出现套峰 非单克隆、杂合子、双位点结合、PolyN结构、PCR非特异性扩增或者是碱基突变导致套峰 √ ? ? 测序峰图呈倒三角形 模板与引物比例太高（多为PCR产物） √ 测序中出现二级结构 序列本身的结构造成 √ 重复序列导致峰图移位 序列本身的结构造成 √ 测序峰图峰宽 机器本身原因、试剂过期、有其他杂质等 √ 如返工后结果仍然峰宽，则不再重做，只收一次费用。 盐分未除尽影响测序 客户处理样品时未处理好，盐分未除尽 √ 客户提供的引物导致结果不理想 引物不纯、标记过的引物、引物含有发夹结构或自身存在末端二聚体 √ ? ? 质粒抽提失败造成反应失败 质粒过大、扩增不好或转化不佳 ? √ ? 鉴定质粒或PCR产物浓度 ? ? √ ? 帮助客户设计引物或进行测序结果的拼接 ? ? √ ? 对于特殊结构模板 片段含有高级结构、高GC含量、含有 重复序列polyA/T/G/C √ ? 要求测通需单独收费 同一样品Walking测序，按照测通的反应数来计算 ? √ ? 引物合成单独收费 客户提供的质粒导致结果不理想 模板不纯、浓度不够、容量不足，而客户强烈要求进行测序的 √ ? ? PCR片段的切胶纯化 切胶纯化后测序结果正常 √ ? 收取切胶费用 质粒抽提 ? ? √ ? 同一样品的验证性实验两次结果一致 ? √ ? 两次都收费 3、测序服务保障 1）时间保障：通常情况下，收到样品后2-3天通过E-mail发送测序结果（大量样品除外），随后可根据客户需要提供打印的测序报告单、彩色峰形图谱和序列文件（收费项目）。如服务中途出现意外影响完成日期，我们会提前通知您。 2）质量结果保障