照射鼠脾DNA含量测定-第二军医大学.PPTVIP

照射鼠脾DNA含量测定 第二军医大学海军医学系 舰船辐射医学教研室 实验目的 了解电离辐射对核酸代谢的影响 学习用二苯胺显色法测定DNA含量的方法 实验原理 DNA 脱氧核苷酸 脱氧核苷 磷酸 戊糖 （D-2-脱氧核糖） 碱基 （A、T、C、G） 水解 D-2-脱氧核糖 二苯胺 显蓝色 595nm测光密度 + 实验步骤 正常与照射小鼠 解剖取脾脏 切小块（20-25mg） 称重并记录 颈椎脱臼致死 去筋膜脂肪 吸干 充分匀浆 匀浆器内加 5ml NaOH 2ml匀浆+ 4ml二苯胺 改10ml试管 90℃水浴15min 摇匀 595nm测光密度 冷却 小鼠脾脏 玻璃匀浆器的使用 计算 待测液中DNA微克数=OD值×303.3 脾标本中DNA含量 = 待测液中DNA微克数×2.5 待测液脾标本的质量 脾标本DNA减少程度 = 正常鼠脾标本DNA含量－照射鼠脾标本DNA含量 正常鼠脾标本DNA含量 计算 待测液中DNA微克数=OD值×303.3 脾标本中DNA含量 = OD×750 mg 脾标本DNA减少程度 = 正常鼠脾标本DNA含量－照射鼠脾标本DNA含量 正常鼠脾标本DNA含量 实验结果 组别 正常鼠DNA含量（ug/mg） 照射鼠DNA含量（ug/mg） DNA减少程度(%) 1 2 3 4 5 6 D-2-脱氧核糖 * D-2-脱氧核糖 *