球菌与杆菌试验二.PDF

实 验 二 球菌与杆菌 实验内容 • 操作 – 葡萄球菌凝固酶试验 – 抗生素的抗菌试验 • 示教 – 病原性球菌形态与染色性观察 – 病原性球菌培养特性观察 – 粪便肠道致病菌的分离和鉴定 示教片 生物因素 • 噬菌体（Bacteriophage） ：是一类侵害细菌的病毒的总称。其噬菌 作用具有专一性。 • 抗生素（Antibiotic ）：是微生物的代谢产物或合成的类似物，在体外 能抑制微生物的生长和存活，而对宿主不会产生严重的副作用。分为广 谱和窄谱两种。 • 细菌素（bacteriocin）：由细菌产生的有杀菌或抑菌作用的物质。对 同种近缘菌株呈现狭窄的活性抑制谱，附着在敏感细胞特异性受点上。 抗生素 细菌素 抗生素的作用原理 干扰病原体的生化代谢过程，影响其结构和功能，使其失 去正常生长繁殖的能力而达到抑制或杀灭病原体的作用 抑制细菌细胞壁的合成 （β- 内酰胺类） 影响细菌细胞膜的通透性 （多粘菌素） 抑制菌体蛋白质的合成 （氯霉素、四环素） 抑制细菌核酸合成 （灰黄霉素） 操作5--抗生素的抗菌试验 • 4人一组 • 菌株：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌1号、2号 密集划线 密集划线 用无菌镊子挑取抗生素滤纸片，贴在平板琼脂表 抑菌圈 面。滤纸片之间距离应基本相等。注意每次取滤 纸片之前，镊子须烧灼灭菌冷却。 将平板置37℃温箱培养24小时后取出观察滤纸片 周围的抑菌圈 用尺子测量其直径并对照细菌对抗生素敏感度判 断表做出结果判断。 实验目的-球菌 • 掌握葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌在 血平板上的培养特性 • 熟悉血浆凝固酶试验 • 了解脓汁标本中病原性球菌的分离与鉴 定方法 血浆凝固酶试验 • 多数致病性葡萄球菌产生的使含有柠檬酸钠或肝素抗凝剂 的人或兔血浆发生凝固的酶类物质。 游离凝固酶(free coagulase)--分泌到菌体外 结合凝固酶(bound coagulase)--在菌体表面 • 鉴别葡萄球菌致病性的指标 纤维蛋白原 方法和原理 致病菌 纤维蛋白原受体 （凝固酶） • 玻片法 适合于结合凝固酶的检查 • 试管法 适合于游离凝固酶的检查 凝固酶 游离凝固酶 反应因子 葡萄球菌 凝血酶 纤维蛋白原 纤维蛋白 • 玻片分为3格，分别加兔血浆、兔血浆和盐水一滴于载玻片 上，挑取试验菌和对照菌分别与它们混匀，立即观察结 果。 兔血浆 生理盐水 S S NS 金葡菌 白葡菌 血浆凝固酶阳性 病原性球菌 基本特征 球形菌，G+或G-，少数有荚膜，无鞭毛、芽胞 主要引起化脓性炎症，故又名化脓性球菌