正常和蛙病毒感染后大鲵血清和黏液蛋白图谱比较分析.PDFVIP

第 4 0 卷 第 3 期 水 生 生 物 学 报 Vol. 4 0, N o. 3 2 0 1 6 年 5 月 ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA M a y, 2 0 1 6 doi: 10.7541/2016.80 正常和蛙病毒感染后大鲵血清和黏液蛋白图谱比较分析 1, 2 1 1 袁江迪 陈中元 张奇亚 (1. 中国科学院水生生物研究所, 淡水生态与生物技术国家重点实验室, 武汉 430072; 2. 中国科学院大学, 北京 100049) 摘要: 为了更好地了解大鲵在感染蛙病毒过程中的生理生化及抗病毒反应, 通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺 凝胶电泳(SDS) 辅以密度分析, 对大鲵正常血清和感染血清、正常黏液和感染黏液的蛋白图谱分别进 行测试比较。结果显示: 在正常血清(CS) 、包括自然感染血清(NS)和人工感染血清(AS)在内的感染血清中, 蛋白带集中在60—80 kD, 其含量超过血清蛋白总量的42%; 正常血清在14—57 kD 之间有16条蛋白带: 57、 53、50、43 、40 、38、36、31、27 、26 、25 、22 、16、15.5、15 和14 kD, 其中正常与感染血清(包括NS和 AS) 比较, 有10条共有蛋白带: 57、43 、40 、31、27 、26 、25 、15.5、15 和14 kD和4条差异蛋白带: 53、33、 22 和16 kD。正常黏液(CM)和感染黏液(NM或AM)共有11条蛋白带: 116、100、75、57、53、45 、27 、18、 17、16和15 kD, 但感染黏液多出7 条蛋白带: 90、52、43 、32、26 、20 和13 kD。还有些蛋白带含量出现变 化, 如45 kD条带在CM 中占总蛋白量的19.3%, 而在AM 中仅占总蛋白的3.8% 。研究证实蛙病毒感染能导致大 鲵黏液和血清蛋白图谱发生变化, 也为深入探寻两栖类抗病毒相关的蛋白生物标记提供了有价值的信息。 关键词: 大鲵; 血清; 黏液; 蛙病毒感染; 十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳; 密度分析; 蛋白图谱 中图分类号: S941.4 文献标识码: A 文章编号: 1000-3207(2016)03-0594-07 大鲵(Chinese giant salamander Andrias davidia- 与侵染等重要的生理生化及免疫保护作用[14—16] 。 nus) 属于有尾目隐鳃鲵科, 是我国特有、也是世界 血清或其他体液蛋白的电泳已作为一种技术, 运用 [1] 于机体生理生化指标的评估或某些疾病的诊 现存最大的两栖动物 。这种两栖动物具有寿命 长、自我修复能力强、能产生特殊体表黏液等特 断[17—19] 。先前还经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝 点, 具有相当高的经济和科研价值。在人工繁养技 胶电泳(SDS) 测定了不同水生脊椎动物的血 [2] 清黏液的相关报道, 显示出它们具有特定的蛋白组 术建立后, 大鲵养殖已初具规模 。学者们围绕大