观赏辣椒种质资源遗传多样性研究.pdf

‘仁中农业大学2005屙硕l。学位论义 或称遗传变异(季维智和宿兵，1999)。遗传多样性是物种进化的基础和本质，也是 人类社会生存和发展的物质基础。“一个基因关系到一个国家的兴衰，一个物种影响’ 一个国家的经济命脉”，已是被无数实例证明了的事实。如第一次“绿色革命”和水 稻杂交优势的利用，就是发现和利用了矮秆基因和不育基因的结果。显而易见，遗 传多样性的研究无论是对生物多样性的保护，还是对生物资源的可持续利用，以及 未柬世界的食物供应，都有重要的意义(李振声，1999)。 I．3检测遗传多样性的主要方法 对遗传多样性的检测最初是从形态学开始的。随着染色体的发现及其结构和功 能的澄清人们又把研究的重点转向染色体上。本世纪60年代酶电泳技术以及特异忡 组织化学染色法应用于群体遗传和进化研究使科学家们从分子水平来客观地揭示遗 传多样性成为可能，并极大地推动了该领域的发展。进入80年代分子生物学和分 子克隆技术的发展带来了～系列更为直接的检测遗传多样性的方法即直接测定遗传 物质本身DNA序列的变异。 1．3．1形态学方法 运用形态学或表型性状柬检测遗传变异是最古老也是最简便易行的方法，形念 标记是在生物生长周期中用肉眼观测到的形念特征，采用统一的标准进行记录。直 到现在形态性状仍然是植物分类的主要依据。形态标记主要有两类，一类是呈孟德 尔遗传的单基因性状，如质量性状、稀有突变等；另一类是由多基因决定的数量性 状。早期研究遗传多样性主要是依据形态标记，结合多元统计分析方法(如主分量 分析、聚类分析、因子分析、对应分析等)揭示性状的遗传变异的样式和结构(甾 颂等，1994)。优点是简便、易行、快速、投资少，常用于一些有重要经济价值的农 作物、林木、园艺作物及其野生近缘种。缺点是数量性状的遗传机制复杂，遗传力 低，容易受环境条件的影响，难以确定标记的同源性，观测标准难掌握，工作量大， 必须借助统计分析减少环境的影响，不能完全满足遗传多样性的需要。将形态标记 与DNA分子标记结合起来是研究遗传多样性的最好方式。 1．3．2细胞学方法 染色体是遗传物质的载体，是基因的携带者，染色体变异必然导致遗传变异的 发生，它是生物遗传变异的重要来源。任何生物类群的天然居群中都存在或大或小 的染色体变异，在生物进化中有着举足轻重的作用。染色体变异主要体现为染色体 组型特征的变异，包括染色体数目的变异和染色体结卡勾的变异。染色体多样性榆测 主要对细胞分裂吲期染色体的数目、形态特征(如大小、形状、相对长度、着丝点 位置、缢痕和随体等)加以分析，即核型分析。细胞学标记的检测需要配备特殊的 显微镜设备，操作人员要有大量的细胞学专业知识和切片制备经验。 观赏辣檄种质资源遗传多栉性研究 电泳核型(Electrophoretic 年代中期发展起来的脉冲电场凝胶电泳(PulsedFieldGel 术，它解决了大分子的分离技术难题，其分辨率达到10Mb。原理是利用脉冲电场凝胶 电泳将一个物种的整个染色体在凝胶上分离成可分辨的谱带，根据染色体的多态性 来鉴别不同材料的遗传差异。用PFGE分析核型，～方面可获得染色体的数目及大 小、基因组结构方面的基本数据，构建出大尺度的物理图谱，另一方面无需DNA分子 杂交和限制性内切酶就可通过电泳核型的差异进行分类和鉴定。并且出于脉冲电泳 图型中的～条带即是一个完整的染色体，因此能够快速地寻找和定位基因。 1 3．3生化标记方法 基因位点不同等位基因编码的、具有同一底物的蛋白质分子，在同～物种的不同个怵 之间有不同的表现形式，具有组织、发育和物种的特异性。通过淀粉或聚丙烯酰腔凝 胶电泳和特定的染色反应，显示同工酶的不同谱带。 同工酶位点是共显性的，即一个等位基因可同时表达，符合孟德尔遗传规律。山 于同工酶在生物界中广泛存在，材料来源丰富，实验技术简单，分析方法快速结果 易于比较等优点，得到广泛的应用，在采样原则、实验方法、数据处理和分析等方 面形成了～套完整和统～的标准，尤其是建立了度量遗传变异和居群遗传结构的定 测编码酶蛋白的基因位点，因此所检测的位点数目也受现行酶电泳和染色方法所限 显色方法。一批同工酶位点的变异并不一定代表整个基因组的变异，1m且有趣p融 减”的变异性可能无法通过酶电泳技术检测出来，所以酶电泳技术可能会低估j逸I‘ 变异的水平(葛颂，洪德元1994)。 1 3．4分子标记方法